[发明专利]一种乳腺组织RNA提取的方法

说明书

本发明提供了一种乳腺组织RNA提取的预处理方法，它是先制作乳腺组织冰冻切片材料，再通过HE染色鉴定切片材料中乳腺腺体组织，切取乳腺腺体组织。将前述乳腺腺体组织直接用于细胞裂解和RNA提取，即可获得高质量、高浓度的RNA。本发明能够解决由RNA提取的乳腺组织稀缺的而引起的RNA提取质量低的问题。

技术领域

本发明涉及RNA提取纯化领域。

背景技术

随着现代医学的发展，生物标志物逐渐成为疾病诊断和治疗的重要参考指标。

在乳腺癌的检测中，需要提取和检测癌变的以及正常的乳腺腺体组织(而非脂肪和结缔组织)中的RNA。癌变乳腺腺体组织相对较容易获得，但正常的乳腺腺体组织则很稀缺。原因是：需要做保乳手术的乳腺癌患者，正常乳腺组织本就较少，不可能大量取样；而需要做全切乳腺及新辅助化疗全切乳腺的案例也不多见。

用于RNA提取的正常乳腺腺体组织稀缺，人们使用常规RNA提取方法经常得到质量低、浓度低的RNA，有时甚至提取不到RNA。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供了一种乳腺组织RNA提取预处理方法和RNA提取方法。

本发明的技术方案包括：

一种乳腺组织RNA提取的样本预处理方法，它是先制作乳腺组织冰冻切片，再通过HE染色鉴定冰冻切片中乳腺腺体组织，切取乳腺腺体组织。

一种乳腺癌组织RNA提取方法，包括：

1)用前述方法进行样本预处理；

2)将切片材料置入细胞裂解液中；

3)提取RNA。

如前述的RNA提取方法，步骤2)的细胞裂解液是QIAGAN RNeasy Mini Kit的裂解液。

如前述的RNA提取方法，步骤3)是使用QIAGAN RNeasy Mini Kit提取RNA。

如前述的RNA提取方法，步骤3)最终使用体积为10～40微升的水或溶解缓冲液溶解RNA。

如前述的RNA提取方法，步骤3)最终使用体积为30微升的水或溶解缓冲液溶解RNA。

本发明具有如下有益效果：

1)本发明的前处理方法包括制作乳腺组织的冷冻切片，可避免新鲜乳腺组织的反复冻融；

2)本发明使用冷冻切片进行RNA提取，可以减少组织使用量，并能准确地确定组织使用量；

3)本发明使用冷冻切片进行RNA提取，其组织用量少的同时，能避免堵塞试剂盒的洗脱柱，提高提取的RNA的质量；

4)本发明使用冷冻切片直接用于RNA提取的裂解步骤，可以使组织充分裂解；

5)本发明的前处理方法包括染色鉴定腺体组织，排除了大量的脂肪及结缔组织，可以保证提取到的RNA的浓度。

显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。

以下通过具体实施方式对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

具体实施方式

实施例1本发明的乳腺组织RNA提取方法

1组织裂解前处理：冰冻切片机切片鉴定及切片取样