[发明专利]一种预防肿瘤发生的免疫细胞培养基及其制备方法与应用

说明书

本发明提供了一种预防肿瘤发生的免疫细胞培养基及其制备方法与应用。本发明首先提供一种培养基组合物，其可用于免疫细胞TPKT(Tumor Prevention Killer T Cells)的培养，其组分包括：A液和B液；其中，A液组成成分包括：基础培养基、IL‑2、IFN‑γ、GMCSF；还可进一步包括TNF‑α；B液组成成分包括：基础培养基、IL‑2、IFN‑γ；还可进一步包括IL‑12。本发明的培养基用于针对可识别、清除机体内表达变异蛋白的肿瘤前体细胞及影像学不可见得微小肿瘤的TPKT细胞的培养，可使免疫细胞的增殖速度更快、识别及免疫功能更强。

技术领域

本发明是关于一种预防肿瘤发生的免疫细胞培养基及其制备方法与应用，属于细胞培养技术领域。

背景技术

肿瘤的传统治疗方法有手术切除、化疗和放射线治疗。手术切除的方法治疗彻底，但术后创伤性较大，若癌细胞入侵蔓延到邻近组织或远端转移，则手术切除的效果就会受到极大限制。这种方法也不适合对微小病灶的治疗，且肿瘤患者手术后肿瘤复发或转移率很高。化疗的方式能够对原发病灶、转移病灶均有一定的治疗作用，但杀灭肿瘤细胞的同时也能杀灭人体正常细胞，毒副作用比较大。而放射线治疗虽然能够对区域敏感性肿瘤产生较好的治疗效果，但受肿瘤部位局限性较大，容易对人体正常组织造成伤害。

免疫细胞治疗技术是运用生物技术治疗肿瘤的一种方法，能有效清除手术、放疗、化疗后残存的癌细胞及微小病灶，降低肿瘤的转移和复发，并有效地补充患者因患病而导致的白细胞数量下降的缺失，恢复和激活身体免疫机制，提高病人自身机体免疫能力，从而达到真正治疗肿瘤的目的。目前，对于机体内由于易感因素等造成的表达变异蛋白的肿瘤前体细胞及不可见微小肿瘤都不能进行准确的诊断，但可以通过免疫细胞治疗技术进行预防及治疗。

预防肿瘤发生的免疫细胞培养如何实现快速扩增，增强其对表达变异蛋白的肿瘤前体细胞及不可见微小肿瘤的识别及清除功能，细胞培养是关键，然而应用现有技术培养免疫细胞时其增长速度慢，免疫功能不强。针对这个问题，目前市场上现有的培养基配制技术还有待于改进和发展。

发明内容

本发明的一个目的在于提供一种可实现免疫细胞快速扩增、增强其识别和清除抗原功能的培养基组合物。

本发明的另一目的在于提供所述的培养基的制备方法。

本发明的另一目的在于提供所述的培养基的应用。

为实现上述目的，一方面，本发明提供了一种用于免疫细胞的培养基组合物，其组分包括：A液和B液；

其中，A液组成成分包括：基础培养基、IL-2、IFN-γ、GM-CSF；还可进一步包括TNF-α；

B液组成成分包括：基础培养基、IL-2、IFN-γ；还可进一步包括IL-12。

根据本发明的具体实施方案，本发明的培养基组合物中，IL-2、IFN-γ、GM-CSF、TNF-α在A液中的用量为：

根据本发明的具体实施方案，本发明的培养基组合物中，IL-2、IFN-γ、IL-12在B液中的用量为：

根据本发明的具体实施方案，本发明的培养基组合物中，所述基础培养基为无血清细胞培养基X-VIVO150或RPMI-1640。

在本发明的一些具体实施方案中，所述A液包括基础培养基、IL-2、IFN-γ、GMCSF与TNF-α。

A液中各组分浓度范围为：

在本发明的一些具体实施方案中，所述B液包括基础培养基、IL-2、IFN-γ与IL-12。

B液中各组分浓度范围为：