[发明专利]键合硒多糖及其制备方法和应用

说明书

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种键合硒多糖，该多糖以具有3,6‑内醚糖结构的多糖类物质为载体，硒原子通过硒代羧酸酯的结构连接在多糖3,6‑内醚结构的6位碳原子上。本发明通过氧化多糖3,6‑内醚键中的6位碳原子，转换其为3,6‑内酯，再与硒代半胱氨酸发生开环成酯反应，制备结构明确，含硒量可控的键合硒多糖产品。所制备的键合硒产品能通过提高血硒含量来显著改善受试生物的免疫能力。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种新的键合硒多糖及其制备方法，以及其在免疫方面的应用。

背景技术

硒是一种对人体非常重要的微量元素，硒代半胱氨酸是第21种氨基酸，硒是已知的25中硒蛋白结构中的重要组成部分，其活性依赖于硒的存在，比如研究者发现硒是动物体内谷胱甘肽过氧化物酶的必需成分。但人体补充硒元素的途径非常有限，常用的所谓食补远远不能满足人体正常的硒代谢水平。为此，研究者于1975年首次明确指出硒是人体必需的微量元素，我国营养学会也于1988年将硒元素列为每日膳食营养元素之一。

近几年出现了人体补充硒元素的产品。一是使用无机亚硒酸钠，但由于缺乏对其生物安全性的可靠评价，使用无机亚硒酸钠存在着食品安全隐患。二是通过富硒土壤种植的作物富硒，产品安全性好，但由于作物自身生长的生理需求所限，作物中的硒含量较低，难以快速实现血液所必须硒含量的正常代谢平衡。三是通过化学方法制备富硒产品，主要是通过亚硒酸钠和浓硝酸对多糖羟基的随机酯化反应来实现，缺点是硒化位点不明确，硒化程度重现性差，多糖中混有的较大量的毒性无机硒成份难以完全去除。

发明内容

本发明提供了一种含硒量可控的键合硒多糖及其制备方法，形成的键合硒多糖结构稳定，有机硒含量确定，具有改善诸多免疫功能的作用。

本发明的技术方案如下：

本发明提供一种键合硒多糖，分子结构特征包括：以具有3,6-内醚糖结构的多糖类物质为载体，硒原子通过硒代羧酸酯的结构连接在多糖3,6-内醚结构的6位碳原子上。

作为优选的，所述多糖来源于提取的天然植物多糖，更优选为卡拉胶。

作为优选的，本发明所述键合硒多糖的分子具有如下任意结构：

其中，上述通式中，n与天然多糖的分子量相关，是多糖重复单元数。

本发明还包括上述键合硒多糖的制备方法，通过RuO₂催化氧化多糖3,6-内醚键中的6位碳原子转换为3,6-内酯，通过硒负离子对内酯的亲核反应发生开环成酯反应，将硒键合到多糖内醚结构的碳原子上。

作为一种更优选的技术方案，本发明所述键合硒多糖的制备方法，包括以下步骤：

(1)所述多糖与氯乙酰氯发生反应，将多糖中羟基中的氢取代为乙酰氯，得到的产物Ⅰ；

(2)产物Ⅰ在RuO₂催化下与次氯酸钠反应，将多糖3,6-内醚键中的6位碳原子转换为3,6-内酯，得到产物Ⅱ；

(3)产物Ⅱ在氨水溶液中反应，将氧乙酰氯转化为羟基，得到产物Ⅲ；

(4)产物Ⅲ与硒代胱氨酸在硼氢化钠存在下发生开环成酯反应，得到键合硒多糖。

本发明作为优选的，步骤(2)中，所述RuO₂的用量为产物Ⅰ重量的2～10％，更优选为5％，反应温度优选为-10～10℃，更优选为0℃。

本发明作为优选的，步骤(3)中，所述氨水溶液的浓度为100～300mM，更优选为150mM，反应时间为3～10min，更优选为4～6min。

本发明中，上述多糖为天然植物多糖，可以为任意一种卡拉胶，如k-卡拉胶、l-卡拉胶或t-卡拉胶。