[发明专利]一种辣根过氧化物酶传感器的制备及其检测槲皮素的方法

权利要求书

1.一种辣根过氧化物酶传感器的制备方法，其特征在于，所述方法选择金属有机框架化合物和金纳米粒子为酶传感器的增敏材料，利用辣根过氧化物酶中的氨基、羧基与金纳米粒子之间的配位作用，将辣根过氧化物酶固定到电极表面，制备得到辣根过氧化物酶传感器，具体步骤如下：

(1)将Cu(NO₃)₂·3H₂O溶解在二次蒸馏水中，得到溶液A；将配体溶解在无水乙醇中，得到溶液B；所述Cu(NO₃)₂·3H₂O为0.200～0.800g；所述二次蒸馏水为5.0～15.0mL；所述配体为0.100～0.600g；所述配体为2-氨基-对苯二甲酸；

将溶液A和溶液B混合均匀后转移到高压反应釜中，于100～150℃反应15～30h；冷却后，离心，用无水乙醇和二次蒸馏水洗涤数遍，在烘箱中干燥，得到金属有机框架化合物产物；所述Cu(NO₃)₂·3H₂O为0.200～0.800g；所述二次蒸馏水为5.0～15.0mL；

(2)将0.1～2.0mg的金属有机框架化合物溶于2～20mL水中，超声分散均匀后，取1～50μL滴至干净的玻碳电极表面，室温下自然晾干，得到金属有机框架化合物修饰玻碳电极；

(3)将金属有机框架化合物修饰玻碳电极置于0.1-10mmol/L的HAuCl₄溶液中，以扫速20～200mV/s，电位范围为-0.5～2.0V，扫描5-50圈，得到金纳米粒子/金属有机框架化合物修饰玻碳电极；

(4)将金纳米粒子/金属有机框架化合物修饰玻碳电极置于浓度为1.0～6.0mg/mL、pH为5.0～7.0的辣根过氧化物酶溶液中，孵育5～15h，得到辣根过氧化物酶/金纳米粒子/金属有机框架化合物修饰玻碳电极，即为检测槲皮素的酶传感器。

2.采用如权利要求1所述的一种辣根过氧化物酶传感器对槲皮素的检测方法，其特征在于，所述方法利用金属有机框架化合物/金纳米粒子复合的增敏作用，在过氧化氢的存在下，被辣根过氧化物酶催化氧化的槲皮素在电极上的电化学还原作用，将辣根过氧化物酶传感器为工作电极，参比电极为Ag/AgCl电极，辅助电极为铂电极，组成三电极体系，实现对槲皮素的高灵敏检测；

所述辣根过氧化物酶传感器用于检测槲皮素的线性范围为4.0mol/L～44mol/L，检测限为2.3mol/L。