[发明专利]CDs/SiO2-SFTSV单克隆抗体缀合物及其制备方法和应用

权利要求书

1. CDs/SiO₂-SFTSV单克隆抗体缀合物，其特征在于，所述CDs/SiO₂-SFTSV单克隆抗体缀合物以CDs/SiO₂荧光纳米球接连SFTSV单克隆抗体获得。

2.权利要求1所述的CDs/SiO₂-SFTSV单克隆抗体缀合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）硅烷化CDs的制备；

2）CDs/SiO₂荧光纳米球的制备及洗涤纯化：所述CDs/SiO₂荧光纳米球的制备方法如下：将CTAB和NaOH溶液加入到水中并搅拌，然后在强搅拌下继续加入TEOS和CDs的混合液并反应，通过离心收集沉淀物；

3）CDs/SiO₂-SFTSV单克隆抗体缀合物的制备。

3.根据权利要求2所述的CDs/SiO₂-SFTSV单克隆抗体缀合物的制备方法，其特征在于，所述步骤1）的硅烷化CDs的制备方法如下：一水合柠檬酸在高温的真空干燥箱中干燥，然后与氮气脱气的N-β-(氨基乙基)-γ-氨基丙基三甲氧基硅烷在高温下反应，形成CDs溶液，随后高速离心，弃去离心管底部大颗粒即得。

4.根据权利要求2所述的CDs/SiO₂-SFTSV单克隆抗体缀合物的制备方法，其特征在于，所述步骤2）的CTAB终浓度为0.02 mg/ml~20 mg/ml，NaOH 终浓度为0.010 mg/ml~6 mg/ml，TEOS终浓度为0.01%~12%，CDs终浓度为0.001%~5%。

5.根据权利要求2所述的CDs/SiO₂-SFTSV单克隆抗体缀合物的制备方法，其特征在于，所述步骤2）的洗涤纯化步骤如下：将离心收集沉淀物分散在HCl和乙醇的混合液中并搅拌以萃取残余物有机模板，并重复萃取，将产物洗涤至中性，最后将获得的氨基封端的CDs/SiO₂荧光纳米球分散在H₂O中。

6.根据权利要求2所述的CDs/SiO₂-SFTSV单克隆抗体缀合物的制备方法，其特征在于，所述步骤3）的CDs/SiO₂-SFTSV单克隆抗体缀合物的制备方法如下：先将丁二酸苷与氨基封端的CDs/SiO₂荧光纳米球反应将其羧基化，得到CDs/SiO₂-COOH；然后利用EDC/NHS将CDs/SiO₂表面的羧基活化，加入SFTSV抗体，室温孵育得到CDs/SiO₂-SFTSV抗体缀合物。

7.基于CDs/SiO₂荧光纳米球免疫层析试纸条，其特征在于，所述基于CDs/SiO₂荧光纳米球的免疫试纸条包括将权利要求1所述的CDs/SiO₂-SFTSV单克隆抗体缀合物与SFTSV通过抗原-抗体之间的相互作用制备的荧光信号标记物。

8.根据权利要求6所述的基于CDs/SiO₂荧光纳米球免疫试纸条，其特征在于，基于CDs/SiO₂荧光纳米球的免疫试纸条还包括依次粘连在黑色底板上的样品垫、包被有检测T线和对照C线的硝基纤维素膜和吸水垫；所述的硝基纤维素膜T线上包被有SFTSV单克隆抗体；所述的硝基纤维素膜C线上包被有羊抗鼠多克隆抗体。

9.根据权利要求7所述的基于CDs/SiO₂荧光纳米球的免疫试纸条，其特征在于，所述T线的SFTSV单克隆抗体的浓度为0.04~0.07 mg/cm²，所述C线的羊抗鼠多克隆抗体的浓度为0.04~0.07 mg/cm²。

10.权利要求7~9任一项所述的基于CDs/SiO₂荧光纳米球免疫试纸条的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：

1）硅烷化CDs的制备；

2）CDs/SiO₂荧光纳米球的制备及洗涤纯化；

3）CDs/SiO₂-SFTSV单克隆抗体缀合物的制备；

4)T线上包被有SFTSV单克隆抗体、C线上包被有羊抗鼠多克隆抗体的硝基纤维素膜的制备；

5）将黑色底板、样品垫、包被有检测T线和对照C线的硝基纤维素膜、吸水垫组合，底板上的硝基纤维素膜的一端粘贴吸水垫，硝基纤维素膜与吸水垫之间相互重叠1~2 mm，在硝基纤维素膜的另一端粘贴样品垫，即得基于CDs/SiO₂荧光纳米球的免疫试纸条。