[发明专利]千柏鼻炎片HPLC指纹图谱的构建方法和检测方法

权利要求书

1.一种千柏鼻炎片HPLC指纹图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

混合对照品溶液的制备：于溶剂中加入金丝桃苷、对羟基肉桂酸、羌活醇、大黄酚、异欧前胡素、绿原酸、欧前胡素、穗花杉双黄酮、大黄素甲醚、大黄素、蛇床子素、咖啡酸和山柰素对照品，得混合对照品溶液；

供试品溶液的制备：于体积分数为25%-100%的甲醇中加入千柏鼻炎片样品进行提取，将提取液滤过后取续滤液，即为供试品溶液；

将所述混合对照品溶液和所述供试品溶液分别注入到高效液相色谱仪中，测定，即得所述指纹图谱；

所述高效液相色谱仪的色谱条件包括：

以乙腈为流动相A，以体积分数为0.1%-0.2%的磷酸水溶液为流动相B，进行梯度洗脱；

所述梯度洗脱具体为：

0-20min，所述流动相A的体积分数由5%升高到6%，所述流动相B的体积分数由95%降低到94%；

20min-38min，所述流动相A的体积分数由6%升高到12%，所述流动相B的体积分数由94%降低到88%；

38min-44min，所述流动相A的体积分数由12%升高到13%，所述流动相B的体积分数由88%降低到87%；

44min-60min，所述流动相A的体积分数由13%升高到20%，所述流动相B的体积分数由87%降低到80%；

60min-64min，所述流动相A的体积分数由20%升高到22%，所述流动相B的体积分数由80%降低到78%；

64min-80min，所述流动相A的体积分数由22%升高到30%，所述流动相B的体积分数由78%降低到70%；

80min-90min，所述流动相A的体积分数由30%升高到40%，所述流动相B的体积分数由70%降低到60%；

90min-102min，所述流动相A的体积分数由40%升高到42%，所述流动相B的体积分数由60%降低到58%；

102min-112min，所述流动相A的体积分数由42%升高到60%，所述流动相B的体积分数由58%降低到40%；

112min-122min，所述流动相A的体积分数由60%升高到90%，所述流动相B的体积分数由40%降低到10%。

2.根据权利要求1所述的千柏鼻炎片HPLC指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述流动相B为体积分数为0.1%的磷酸水溶液。

3.根据权利要求1所述的千柏鼻炎片HPLC指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述高效液相色谱的色谱条件还包括：

以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流速为0.5ml/min-1.2ml/min，柱温25℃-35℃，检测波长190nm -400nm。

4.根据权利要求3所述的千柏鼻炎片HPLC指纹图谱的构建方法，所述流速为1ml/min，柱温30℃，检测波长267nm。

5.根据权利要求1-4任一项所述的千柏鼻炎片HPLC指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述提取的方法为超声提取，所述提取的时间30min-2h。

6.根据权利要求1所述的千柏鼻炎片HPLC指纹图谱的构建方法，其特征在于，每1ml所述混合对照品溶液含有：200±10μg金丝桃苷、100±10μg对羟基肉桂酸、60±10μg羌活醇、100±10μg大黄酚、60±10μg异欧前胡素、200±10μg绿原酸、40±10μg欧前胡素、100±10μg穗花杉双黄酮、80±10μg大黄素甲醚、80±10μg大黄素、150±10μg蛇床子素、100±10μg咖啡酸和80±10μg山柰素。