[发明专利]一种免疫细胞复苏培养液及其制备方法

说明书

本发明提供一种免疫细胞复苏培养液，包括氨基酸、膦酸类化合物、维生素、盐类、蛋白或多肽、酶或辅酶、细胞因子、植物提取物。本发明免疫细胞复苏培养液能够有效保持免疫细胞复苏后的生理功能和生物学特性，可应用于临床治疗；本发明的免疫细胞复苏培养液中不含动物血清，因此不会引入外源蛋白，降低了动物病原污染的可能性，不会对人体过继免疫治疗产生影响；与进口免疫细胞复苏培养液相比，成本低，廉价；与传统的免疫细胞复苏培养液相比，免疫细胞的复苏率高，免疫细胞增殖活性高，可以长时间保存。

技术领域

本发明涉及细胞培养技术领域，尤其涉及一种免疫细胞复苏培养液及其制备方法。

背景技术

免疫细胞治疗已成为全世界医疗领域内对难治性疾病(如恶性肿瘤)进行治疗的新的重要医疗手段，例如肿瘤疫苗和过继免疫疗法，采用CAR-T细胞对B细胞淋巴瘤进行治疗，主要是通过自体的免疫细胞经体外刺激、培养、扩增然后回输来提高患者的免疫力，这些方法对科学界和医疗界而言，获得质量稳定可靠、功能优良的免疫细胞对获得良好的临床治疗效果非常关键。随着免疫细胞个性化技术的兴起，目前认为体外快速扩增天然形式免疫细胞或遗传修饰的免疫细胞后再回输到哺乳生物体内，有利于提高机体的免疫防御能力，表现在可以提高机体抗肿瘤等疾病治疗能力、使组织器官年轻化以及延长机体寿命的能力。

目前该类细胞主要有树突状细胞(DC)，细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)，自然杀伤细胞(NK)，树突状细胞诱导的杀伤细胞(DC-CIK)，嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)等。这些经诱导和扩增培养的免疫细胞，它的初始细胞来源都是外周血或脐血的单个核细胞，而且是直接分离培养。

免疫细胞培养如何实现快速扩增又不影响其功能是免疫细胞培养的关键，然而现有技术中培养免疫细胞时其增长速度慢。

发明内容

本发明的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种免疫细胞复苏培养液及其制备方法。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：

一种免疫细胞复苏培养液，包括氨基酸、膦酸类化合物、维生素、盐类、蛋白或多肽、酶或辅酶、细胞因子、植物提取物。

优选地，所述氨基酸包括S-腺甘蛋氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、马尿酰-组氨酰-亮氨酸、DL-高半胱氨酸、D-羟脯氨酸、DL-高胱氨酸、DL-3-氨基丁酸、聚精氨酸中的一种或多种。

优选地，所述膦酸类化合物包括唑来膦酸、依替膦酸、伊班膦酸、帕米膦酸、阿仑膦酸、利塞膦酸、米罗磷酸中的一种或多种。

所述维生素包括维生素E、维生素B12、盐酸噻胺、核黄素、视黄酸、盐酸吡哆醇、D-泛酸钙、烟酸、甲萘醌、N-羟基琥珀酰亚胺生物素、叶酸、D-生物素、抗坏血酸钠、抗坏血酸中的一种或多种。

所述盐类包括氯化钙、氯化钾、七水合硫酸镁、亚硒酸钠、氯化钠、磷酸二氢钠、碳酸氢钠中的一种或多种。

优选地，所述蛋白或多肽包括胶原蛋白、组蛋白、多聚赖氨酸、纤粘连蛋白、层粘连蛋白、人胰岛素、γ-人球蛋白中的一种或多种。

优选地，所述酶或辅酶包括半乳糖氧化酶、谷氨酰胺转胺酶、辅酶Q10、门冬酰胺酶中的一种或多种。

优选地，所述细胞因子包括表皮生长因子、血小板衍生生长因子、胰岛素样生长因子、血管内皮细胞生长因子、人血清白蛋白、集落刺激因子、肿瘤坏死因子、巨噬细胞集落刺激因子、白介素、干扰素中的一种或多种。

优选地，所述植物提取物包括龙血素、红景天苷、石斛提取物、辣木籽提取物的一种或多种。

优选地，所述龙血素、红景天苷、石斛提取物、辣木籽提取物的质量比为：龙血素：红景天苷：石斛提取物：辣木籽提取物＝1～3:1～3:2～4:1～4。