[发明专利]一种荧光素母体结构的检测肼用荧光探针

说明书

本发明提供一种荧光素母体结构的检测肼用荧光探针，具体涉及荧光探针领域，S1、将适量二氯荧光素和三乙胺加入到圆底烧瓶中后；S2、加入适量无水二氯乙烷后混合搅拌，向圆底烧瓶中慢慢地滴加适量溶有丙烯酰氯的无水二氯乙烷溶液，在室温下反应，通过TLC监测；S3、待反应结束之后，解除真空状态，旋干溶剂，柱层析，得探针。本发明运用肼的强亲核特性与探针分子底物的反应，游离出二氯荧光团母体来，荧光从无到有，进而实现对肼的检测研究。

技术领域

本发明属于荧光探针领域，具体涉及一种荧光素母体结构的检测肼用荧光探针。

背景技术

荧光素，也称为荧光黄，荧光红，化学名称为3’,6’-二羟基螺[异苯并呋喃-1(3H),9’ -(9H)-吨-3-酮]或2-(6-羟基-3-氧代-3H-呫吨-9-基)苯甲酸。虽然荧光素的结构类似于 罗丹明的结构，但由于两个苯环通过氧桥连接在同一平面上，该分子在刚性共面表面上具有更大的共轭结构，并且由于激发光的作用而具有强的黄绿色荧光。荧光素及其衍生 物具有许多优点：激发波长和发射波长均在可见光范围内，水中荧光量子产率高，消光 系数高，无毒副作用，成本低廉等。因此，它通常用作生物染色剂，荧光光度计和氧化 还原指示剂等。

发明内容

本发明的目的是提供一种荧光素母体结构的检测肼用荧光探针，基于荧光素衍生物 二氯荧光素设计合成了肼检测用荧光探针，并对其分子结构进行了相应的表征分析，运用肼的强亲核特性与探针分子底物的反应，游离出二氯荧光团母体来，荧光从无到有， 进而实现对肼的检测研究。

本发明提供了如下的技术方案：

一种荧光素母体结构的检测肼用荧光探针，探针合成步骤如下：

S1、根据下述公式，

将二氯荧光素(0.40g,1.0mmol)和三乙胺(1.2mmol,168μL)加入到圆底烧瓶中后，

S2、在0℃、氮气保护下，加入10mL无水二氯乙烷后混合搅拌，向圆底烧瓶中慢慢地滴加溶有丙烯酰氯(1.5mmol,123μL)的10mL无水二氯乙烷溶液，在室温下反应，通 过TLC监测。

S3、待反应结束之后，解除真空状态，旋干溶剂，柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝5:1为淋洗液)，得探针。

本发明的有益效果：

本发明运用肼的强亲核特性与探针分子底物的反应，游离出二氯荧光团母体来，荧 光从无到有，进而实现对肼的检测研究。

附图说明

附图用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本发明的实施 例一起用于解释本发明，并不构成对本发明的限制。在附图中：

图1为探针的检测限；

图2为在350μMN2H4存在下，在25℃下，探针(10μM)在水溶液 (DMSO/PBS＝1:9,pH＝7.4)中的时间依赖性荧光变化；λex＝504nm；

图3为在缓冲溶液中不存在和存在肼的情况下探针(10μM)的吸收光谱变化；

图4为荧光光谱变化(DMSO/PBS＝1:9,v/v,10mM,pH＝7.4,在25℃下，λ em/ex＝528/504nm)；

图5为探针(10μM)对N2H4(350μM)阳离子在在504nm激发时的光谱；

图6为各种分析物(1000μM)在缓冲溶液中的荧光响应 (DMSO/PBS＝1:9,v/v,10mM,pH＝7.4；λem/ex＝530/504nm)在25℃下阴离子在504nm激发 时的光谱；

图7为氨基化合物在504nm激发时的光谱；