[发明专利]一种猪伪狂犬病病毒亚单位疫苗的制备方法及其应用

说明书

本发明公开了一种猪伪狂犬病病毒亚单位疫苗的制备方法及其应用，其包含：采用SEQID NO:1或SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:9的核酸分子或者与SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:9的核苷酸序列95％以上相同的核酸分子编码的猪伪狂犬病毒相关蛋白。该疫苗使用真核表达，产品的抗原性、免疫原性与天然蛋白质相似，表达水平较高，免疫原性强，保护效果好，对动物没有致病性，并且本发明的疫苗可以通过生物反应器大规模无血清悬浮培养制备，同时大大降低了疫苗生产成本。

技术领域

本发明属于动物疫苗技术领域，尤其涉及一种猪伪狂犬病病毒亚单位疫苗的制备方法及其应用。

背景技术

伪狂犬病是由伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus，PrV)引起的多种家畜和野生动物共患的一种急性传染病。猪是伪狂犬病毒的贮存宿主，病猪、带毒猪以及带毒鼠类为本病重要传染源。该病在猪呈暴发性流行，仔猪和其他易感动物多为急性致死性症状，具有明显的神经症状、死亡率高达100％；成年猪多为隐性感染，表现为繁殖障碍与呼吸道症状，妊娠母猪流产、死胎，公猪不育，育肥猪呼吸困难、生长停滞等，是危害全球养猪业的重大传染病之一。

伪狂犬病病毒属于疱疹病毒科(Herpesviridae)、猪疱疹病毒属，属于双股线性DNA病毒，病毒粒子呈椭圆或圆形外观，主要由3层核衣壳和囊膜组成。在已经发现的PrV11种糖蛋白中，可分为必需糖蛋白(gB、gD、gH和gL蛋白)和非必需糖蛋白(gC、gE、gG、gI、gK、gM和gN蛋白)两大类。gB蛋白是PrV的1个重要囊膜组分和中和抗原，对于其感染必不可少。gB蛋白与gC蛋白形成1种糖蛋白复合物可以介导病毒与肝素样受体的结合。gD蛋白参与病毒穿透过程，同时gD蛋白也是PrV主要的免疫原性蛋白之一，它刺激机体产生的抗gD抗体具有中和保护能力。gH和gL蛋白则是必须糖蛋白的组分。

疫苗接种是预防、控制甚至消灭伪狂犬病的主要措施之一。目前用于预防、控制猪伪狂犬病的疫苗较多都是传统的弱毒苗和灭活疫苗，有少数基因工程亚单位疫苗。但灭活疫苗存在自身免疫保护力较弱，且存在灭活不完全，造成散毒的风险；弱毒活疫苗存在毒株毒力返强的风险；亚单位疫苗存在疫苗生产成本高，免疫原性不及弱毒疫苗及灭活疫苗的问题。

发明内容

本发明旨在提供一种猪伪狂犬病病毒亚单位疫苗的制备方法及其应用，以解决现有技术中的问题。

为达到上述目的，根据本发明的一个方面，提供了一种免疫组合物，包含：

采用序列如SEQ ID NO:1所示的核酸分子或者与SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列95％以上相同的核酸分子编码的猪伪狂犬病毒gB蛋白；采用序列如SEQ ID NO:3所示的核酸分子或者与SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列95％以上相同的核酸分子编码的猪伪狂犬病毒gC蛋白；采用序列如SEQ ID NO:5所示的核酸分子或者与SEQ ID NO:5所示的核苷酸序列95％以上相同的核酸分子编码的猪伪狂犬病毒gD蛋白；采用序列如SEQ ID NO:7所示的核酸分子或者与SEQ ID NO:7所示的核苷酸序列95％以上相同的核酸分子编码的猪伪狂犬病毒gH蛋白；采用序列如SEQ ID NO:9所示的核酸分子或者与SEQ ID NO:9所示的核苷酸序列95％以上相同的核酸分子编码的猪伪狂犬病毒gL蛋白。