[发明专利]一种检测6-苄基腺嘌呤的试纸条及方法

说明书

本发明公开了一种检测6‑苄基腺嘌呤的试纸条及方法。该试纸条包括试纸和微孔试剂，所述试纸包括反应膜、样品吸收垫、吸水垫和底板，所述反应膜上具有包被有6‑苄基腺嘌呤半抗原‑载体蛋白偶联物的检测线和包被有羊抗鼠抗抗体的质控线，所述微孔试剂上冻干有6‑苄基腺嘌呤单克隆抗体‑胶体金标记物。用本发明试纸条检测6‑苄基腺嘌呤的方法简便、快速、直观、准确、便于携带、适用范围广、成本低、易推广使用。

技术领域

本发明涉及一种检测6-苄基腺嘌呤的试纸条及方法，具体涉及一种用于检测6-苄基腺嘌呤的胶体金试纸条，其特别适用于豆芽中6-苄基腺嘌呤残留的检测。

背景技术

6-苄基腺嘌呤(6-benzylarninopuring，6-BA)是一种人工合成的细胞分裂素，为白色或类白色晶体，难溶于水，微溶于乙醇，在酸、碱中稳定。具有抑制植物叶内叶绿素、核酸和蛋白质分解的作用，主要用于粮食、果树栽培和园艺，作物各个生长阶段都可应用。6-BA目前被广泛用作无根豆芽的生长调节剂。人体摄入过多6-BA会刺激皮肤黏膜，造成食道、胃黏膜损伤，出现恶心、呕吐等。我国原国家食品药品监督管理总局、农业部、国家卫生和计划生育委员会关于豆芽生产过程中禁止使用6-苄基腺嘌呤等物质的公告(2015年第11号)中规定：生产者不得在豆芽生产过程中使用6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸钠、赤霉素等物质，豆芽经营者不得经营含有6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸钠、赤霉素等物质的豆芽。

目前已报道的检测6-苄基腺嘌呤的方法主要是液相色谱法、液相色谱串联质谱法等仪器方法。这些方法均须在实验室条件下操作，样品前处理繁琐费时，还需配备昂贵的仪器设备，检测成本较高、耗时长、操作复杂，在实际应用过程中有很大的限制性，难以满足大量样品和现场样品快速检测的需要。因此，开发一种简单快速、适于豆芽中6-苄基腺嘌呤残留的胶体金试纸条，可满足大量样品现场筛选和监控，能够更好地满足我国食品监管部门等开展检测工作。

发明内容

本发明的目的在于提供一种能够检测豆芽中6-苄基腺嘌呤残留的胶体金试纸条，并且提供一种高效、准确、简便、适于现场监控和大量样本筛查的检测方法。

本发明所提供的检测6-苄基腺嘌呤的试纸条，包括试纸和微孔试剂；所述试纸包括底板、样品吸收垫、反应膜、吸水垫，其依次连接，所述反应膜上具有包被有6-苄基腺嘌呤半抗原-载体蛋白偶联物的检测线和包被有羊抗鼠抗抗体的质控线；所述微孔试剂上冻干有6-苄基腺嘌呤单克隆抗体-胶体金标记物，其具有微孔塞。

所述6-苄基腺嘌呤单克隆抗体是以6-苄基腺嘌呤半抗原-载体蛋白偶联物作为免疫原制备获得。

所述6-苄基腺嘌呤半抗原-载体蛋白偶联物由6-苄基腺嘌呤半抗原与载体蛋白偶联得到，所述载体蛋白为牛血清白蛋白、卵清蛋白、血蓝蛋白、甲状腺蛋白或人血清白蛋白，所述6-苄基腺嘌呤半抗原是由氨基-6-苄基腺嘌呤与4-(3-氧代丙基)-苯甲酸反应得到，其分子结构式为：

所述底板可为PVC底板或其他硬质不吸水的材料；所述样品吸收垫可为吸滤纸或滤油纸；所述吸水垫为吸水纸；所述反应膜可为硝酸纤维素膜或醋酸纤维素膜。

本发明的另一个目的是提供一种制备上述试纸条的方法，其包括步骤：

1)制备冻干有6-苄基腺嘌呤单克隆抗体-胶体金标记物的微孔试剂；

2)制备具有包被有6-苄基腺嘌呤半抗原-载体蛋白偶联物的检测线和包被有羊抗鼠抗抗体的质控线的反应膜；

3)将2)制备好的反应膜与样品吸收垫、吸水垫、底板组装成试纸；

4)将1)和3)制备好的冻干有6-苄基腺嘌呤单克隆抗体-胶体金标记物的微孔试剂和试纸组装成试纸条。

具体地说，步骤包括：