[发明专利]一种球等鞭金藻的保存方法

说明书

本发明提供了一种球等鞭金藻的保存方法，属于微藻培养技术领域，所述方法包括以下步骤：1)用含混合抗冻剂的f/2培养基培养球等鞭金藻至对数生长期获得球等鞭金藻培养液；2)向步骤1)中所述的球等鞭金藻培养液中加入氯化铁进行絮凝，获得絮凝的球等鞭金藻细胞；3)收集所述絮凝的球等鞭金藻细胞，冷冻干燥后，密封保存；步骤1)中所述混合抗冻剂包括二甲亚砜和甲醇。利用本发明所述方法保存球等鞭金藻，在常温保存一年后，所述球等鞭金藻细胞的存活率能够达92％，远远大于常规的保藏方法的细胞存活率。

技术领域

本发明属于微藻培养技术领域，尤其涉及一种球等鞭金藻的保存方法。

背景技术

球等鞭金藻属于金藻门，金藻纲，等鞭金藻目，等鞭金藻科，等鞭金藻属的单细胞海洋浮游藻类生物，为海洋动物幼虫很好的开口饵料，被广泛用作水产经济软体动物幼虫基础饵料。球等鞭金藻含有较多胡萝卜素、叶黄素，因而呈褐黄色，是单细胞生活的个体，没有由纤维素和果胶组成的细胞壁，大多数呈楠圆形，幼细胞有一略呈扁平的背腹面，故侧面观为长椭圆形或长方形，因细胞前端生出两条等长的尾鞭形鞭毛，得名球等鞭金藻。

微藻的浓缩是采用高速离心机、超滤膜等物理方法或采用化学试剂进行絮凝的化学方法将新鲜培养的低浓度藻液浓缩成高浓度的藻泥或藻膏。微藻在水产养殖中的重要性日益突显，研究开发微藻的保存技术也越来越受到重视。微藻浓缩冻干是将藻液置于低温条件下制成冻干粉，并在过程中加入各种抗冻剂等的多种处理方法，最终冻干粉在常温保存一定时间后，使藻细胞尽可能的拥有较高的存活率并保持原有的营养物质含量不变，更加有利于各种研究的进行和微藻的商业性开发利用。

但是目前的对于球等鞭金藻的保存方法，保存时间短，长时间保存后的细胞存活率低。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种球等鞭金藻的保存方法，所述保存方法能够对球等鞭金藻进行长期保存，且长期保存后的球等鞭金藻细胞的存活率高。

为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：

本发明提供了一种球等鞭金藻的保存方法，包括以下步骤：

1)用含混合抗冻剂的f/2培养基培养球等鞭金藻至对数生长期获得球等鞭金藻培养液；

2)向步骤1)中所述的球等鞭金藻培养液中加入氯化铁进行絮凝，获得絮凝的球等鞭金藻细胞；

3)收集所述絮凝的球等鞭金藻细胞，冷冻干燥后，密封保存；

步骤1)中所述混合抗冻剂包括二甲亚砜和甲醇。

优选的，所述二甲亚砜在所述f/2培养基中的质量百分含量为8％～12％。

优选的，所述甲醇在所述f/2培养基中的质量百分含量为8％～12％。

优选的，步骤2)中加入的氯化铁在所述球等鞭金藻培养液中的终浓度为60～200mg/L。

优选的，步骤2)中加入的氯化铁在所述球等鞭金藻培养液中的终浓度为80～180mg/L。

优选的，步骤2)中加入的氯化铁在所述球等鞭金藻培养液中的终浓度为160mg/L。

优选的，步骤2)中所述絮凝的时间为25～35min。

优选的，步骤1)中所述培养的温度为24～27℃，光照强度为3000～4000Lux，所述光照的光暗周期为12h:12h。

优选的，步骤1)中所述培养的盐度为28～32。

优选的，步骤2)中所述密封保存的容器为安瓿管。