[发明专利]一种高纯度根皮苷的制备及其质量检测方法

说明书

本发明涉及一种高纯度根皮苷的制备及其质量检测方法，该方法是将多穗柯的干燥叶片粉末用乙醇回流提取，合并提取液浓缩，混悬液用石油醚萃取后，取水液部分再用乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯层浓缩，得萃取物；乙酸乙酯萃取物经硅胶柱层析，用甲醇‑二氯甲烷系统梯度洗脱，用薄层色谱检测，收集含有根皮苷的洗脱液合并，减压浓缩，再经凝胶柱层析，用甲醇‑三氯甲烷系统洗脱，收集含有根皮苷的洗脱液，减压浓缩，重结晶，得到根皮苷粗结晶；再用制备高效液相法分离纯化，对所收集的洗脱液利用HPLC检测，得到纯度在90%～98%之间的根皮苷和纯度大于98%的根皮苷组分。本发明工艺简单分离速度快，生产周期短，所得产品纯度高，质量可控，适合工业化生产。

技术领域

本发明涉及一种从中药植物中提取根皮苷的技术领域，具体涉及一种高纯度根皮苷的制备及其质量检测方法。

背景技术

化学对照品又称标准品，是中药质量标准研究、质量检测和质量控制的实物对照，中药化学对照品的研究，是中药标准化研究的一个非常重要的部分，对产品的质量评价，特别是在药品生产的质量控制中，中药化学对照品起着极其重大的作用，是中药质量控制的基础与核心。根皮苷是一种黄酮类化学成分，化学名称为1-(2-( β-D-吡喃葡萄糖氧基)-4,6-二羟基苯基)-3-(4-羟基苯基)-丙酮，是多穗柯等植物的活性成分之一，也是许多植物和药品标准质量控制的指标性成分。目前尚未有相应的国家药品标准物质，国内外对根皮苷中药化学对照品的系统研究未见报道。

根皮苷主要存在于蔷薇科苹果树的根皮、茎、嫩叶以及苹果果实中，1835年由法国化学家Petersen从苹果树皮中首次分离得到。根皮苷在菊科、杜鹃花科、豆科、壳斗科、百合科等植物中也有少量存在，但在壳斗科石柯属植物甜茶多穗石柯中发现有大量的根皮苷存在。近年来，在荔枝果皮、杜梨叶、锁阳等植物中也发现有根皮苷的存在，其含量都较少。总的说来，苹果树的根皮、茎、嫩叶、苹果果实以及多穗石柯是根皮苷的主要来源，可以作为提取根皮苷的原料加以利用。目前，在根皮苷的提取分离和含量测定方法方面，检索到相关的文献，如：

1.【题名】多穗柯化学成分研究，【作者】李胜华、伍贤进、杨青丹、陈原阳、周楠。【摘要】对多穗柯的化学成分进行提取和分离纯化,并通过理化数据及波谱分析鉴定化合物结构。结果:从多穗柯的醇提物中分离出9个化合物,分别是:根皮苷(Ⅰ)、根皮素(Ⅱ)、二氢查尔酮-2′--βD-吡喃葡萄糖苷(Ⅲ)、胡萝卜苷(Ⅳ)、β-谷甾醇(Ⅴ)、槲皮素(Ⅵ)、木犀草素(Ⅶ)、槲皮苷(Ⅷ)及齐墩果酸(Ⅸ)等9种化合物。结论:除化合物Ⅰ和Ⅲ外均为首次从该植物中分离。

2.【题名】野金柴化学成分的分离和研究，【作者】金弘昕、赵亚、赖小平、陈建南、黄松。【摘要】利用ODS柱层析,聚酰胺树脂柱层析,制备液相的方法对野金柴中的化学成分进行分离和纯化,并通过IR、NMR等光谱技术和化学方法鉴定化合物的结构。结果分离得到7个化合物,经鉴定分别为胡萝卜苷(1)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(2)、槲皮苷(3)、3-羟基根皮苷(4)、根皮苷(5)、山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖苷(6)、齐墩果酸(7)。结论山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖苷为首次从野金柴植物中分离得到。

3.【题名】木姜叶柯中根皮苷的提取工艺优选，【作者】陈文、杜明月、刘浩然【摘要】分别提取木姜叶柯中的根皮苷，比较提取物得率。结果：热水提取法所获得的根皮苷纯度及含量最高。以1：20料液比，提取2h，提取3次为热水提取法最佳工艺。结论：热水提取法是木姜叶柯中根皮苷的最优提取方法。

4.【题名】荔枝果皮中根皮苷的提取工艺研究，【作者】张贺兴、刘胜来【摘要】以不同浓度乙醇作为提取溶剂,分别使用浸提法、回流法、超声波法提取荔枝果皮中的根皮苷,用高效液相色谱测定根皮苷含量。采用L9(34)正交表确定最佳提取工艺。结果热回流法提取效果较好,40%乙醇溶液10倍量回流提取10 min为优化提取方案。结论：优选确定的提取工艺可用于提取荔枝果皮的根皮苷。