[发明专利]多糖物质用于制备山羊精子冷冻保存用稀释液的应用及制备方法

说明书

本发明公开了一种多糖物质用于制备山羊精子冷冻保存用稀释液的应用及制备方法，所述的多糖物质包括银耳多糖、香菇多糖、木耳多糖或虫草多糖中的一种或多种。本发明同时还提供了一种山羊精子冷冻保存用稀释液，包括多糖物质、营养物质、缓冲物质等。本发明的山羊精子冷冻保存用稀释液，具有提高精液冷冻保存后精子活率、顶体和质膜完整率，使得山羊的繁殖性能和经济效益有显著提高的效果。

技术领域

本发明属于动物生物技术领域，涉及动物繁殖技术，尤其涉及多糖物质用于制备山羊精液保存用稀释液的应用及制备方法。

背景技术

动物精液冷冻保存是将精液进行特殊处理，保存在超低温下，以达到长期保存的目的。但是精子在降温和冷冻保存的过程中，很容易产生各种损伤，包括物理性的、化学性的和生物性的损伤。与新鲜精液相比较，经冷冻-解冻处理的精液，其精子的成活率、精子活率、顶体完整率、线粒体活性和受胎率显著下降，而山羊的精液更是如此，这对于生产实践和科学研究来说是极其不利的因素。尽管山羊精液的冷冻保存技术已经有了长足的发展，但目前仍然存在很多问题有待解决。

发明内容

针对现有技术的缺陷或者不足，本发明提供了一种多糖物质用于制备山羊精子保存用稀释液的应用及制备方法。

本发明同时还提供了一种山羊精子冷冻保存用稀释液，所提供的山羊精子冷冻保存用稀释液用于保存山羊精子，包括多糖物质。

多糖物质用于制备山羊精子冷冻保存用稀释液的应用，所述的多糖物质包括银耳多糖、香菇多糖、木耳多糖或虫草多糖中的一种或多种。

一种山羊精子冷冻保存用稀释液，所述的山羊精子冷冻保存用稀释液包括多糖物质以及营养物质，所述的多糖物质包括银耳多糖、香菇多糖、木耳多糖或虫草多糖中的一种或多种。

更优选的，一种山羊精子冷冻保存用稀释液，所述的山羊精子冷冻保存用稀释液包括多糖物质、营养物质、缓冲物质、冷冻保护剂以及抗菌物质，所述的多糖物质包括银耳多糖、香菇多糖、木耳多糖或虫草多糖中的一种或多种。

更具体的，所述的山羊精子冷冻保存用稀释液包括多糖物质、果糖、柠檬酸三钠、柠檬酸、碳酸氢钠、卵磷脂、二甲基亚砜、甘油、青霉素和链霉素。

优选的，所述的山羊精子冷冻保存用稀释液的pH值为7。

本发明山羊精子冷冻保存用稀释液的制备方法，包括如下步骤：

(1)将柠檬酸三钠0.25-1.25g，柠檬酸0.75-6g，碳酸氢钠0.062-0.5g，加50mL无菌水溶解，调节pH至7后定容至100mL，得到A液；

(2)将果糖0.5-4g，卵磷脂0.125-1g，二甲基亚砜6-30mL，甘油6-30mL，加A液50mL溶解，调节pH至7后定容至100mL，得到B液；

(3)将青霉素0.07-0.56g，链霉素0.06-0.48g，加B液50mL溶解，调节pH至7后定容至100mL，得到C液；

(4)取多糖物质0.005-1.8g，用无菌水50mL溶解后定容至100mL，3000转/min离心20min，取上清液，得到D液；

(5)取D液20mL，加入C液，并定容至100mL，即得到添加多糖物质的山羊精子冷冻保存用稀释液。

更具体的，包括如下步骤：

(1)将柠檬酸三钠1.25g，柠檬酸3.35g，碳酸氢钠0.28g，加50mL无菌水溶解，调节pH至7后定容至100mL，得到A液；

(2)将果糖2.25g，卵磷脂0.53g，二甲基亚砜18mL，甘油18mL，加A液50mL溶解，调节pH至7后定容至100mL，得到B液；