[发明专利]肺癌患者尿液表达的KNG1蛋白的应用

说明书

本发明提供检测尿液蛋白表达的一种方式，并成功检测出正常人与肺癌患者尿液中Kininogen 1（KNG1）的表达。本发明通过研究证实正常人与肺癌患者尿液中KNG1的表达，证实对患者的疾病情况具有诊断价值。

技术领域

本发明涉及检测正常人与肺癌患者的尿液蛋白，并证实在尿液中，肺癌患者的尿液中KNG1的含量显著高于正常人。

背景技术

肺癌是世界上导致癌症死亡的主要原因，占所有癌症死亡人数的1/4以上。每年肺癌导致40万人死亡。目前，肺癌治疗的主要手段仍然是手术切除，但是一旦疾病发展到转移阶段，手术切除治疗通常无效，并且晚期患者预后不良。化疗一般不能治疗转移性肺癌患者，疾病5年生存率15%，目前还没有明确的治疗肺癌的最佳方法。肺癌患者的低生存率归因于无法进行早期诊断，因此无法进行有效的外科治疗。因此，迫切需要早期检测肺癌的手段来降低死亡率。

Kininogen 1（KNG1）是一种半胱氨酸蛋白酶抑制剂，已知可抑制内皮细胞增殖和血管生成。已有使用质谱法检测出KNG1，并且最近KNG1已被鉴定为晚期大肠腺瘤和结直肠癌的血清生物标志物/除唾液可用于口腔鳞状细胞癌检测和监测高危个体外，在肺癌患者中，KNG1水平的疾病相关性仍有待评估。我们检测了尿液中KNG1蛋白的表达，验证了KNG1蛋白对肺癌诊断的价值，本发明将提供人尿液表达的KNG1蛋白的应用。

发明内容

本发明的目的在于提供人尿液表达蛋白的检测方式。

优选地，所述人尿液为正常人与肺癌患者的尿液。

优选地，所述蛋白为KNG1。

发明人首先收集正常人和肺癌患者的尿液，之后采用ELISA法进行验证，结果与患者的疾病情况，证实尿液中KNG1和肺癌具有相关性。

为让本发明的上述和其它目的、特征和优点能更明显易懂，下文特举较佳实施例，并配合附图，作详细说明如下。

附图说明：尿KNG1在正常人与肺癌患者中的表达。

具体实施方式

实施例1 尿液收集

收集肺癌患者与正常人的尿液，任何尿液样本均无出血迹象，所有尿液样本中的白蛋白/肌酐比值（a/cr）均小于30mg/g。从每个受试者身上收集50毫升的中段尿，并放入无菌聚丙烯试管中。立即将样品在400 g下离心15分钟，然后将上清液在-80°C下冷冻。

实施例2 KNG1蛋白的检测

使用酶联免疫吸附测定试剂盒测量尿液KNG1。尿液样本在酶联免疫吸附测定板中孵育。用680型微板分析仪（BIO-RAD）在450nm处测量光密度。利用标准样品的浓度和对应的光密度值，绘制出每一平板的标准曲线。同时试验中采用了阳性和阴性对照，以提高该方法的有效性。

虽然本发明已以较佳实施例披露如上，然其并非用以限定本发明，任何所属技术领域的技术人员，在不脱离本发明的精神和范围内，当可作些许的更动与改进，因此本发明的保护范围当视权利要求所界定者为准。