[发明专利]间充质干细胞的活化方法和干细胞制剂及其应用在审

专利信息
申请号: 201910649113.7 申请日: 2019-07-18
公开(公告)号: CN110368401A 公开(公告)日: 2019-10-25
发明(设计)人: 郝好杰;李梓源;景浩然;陈惠华;周严恒 申请(专利权)人: 北京恒峰铭成生物科技有限公司
主分类号: A61K35/28 分类号: A61K35/28;A61K35/51;A61P19/08;C12N5/0775
代理公司: 深圳中一联合知识产权代理有限公司 44414 代理人: 张杨梅
地址: 102200 北京市昌平区*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 间充质干细胞 活化 培养基 干细胞制剂 表达水平 应用 生物医药技术 黄芪水提物 骨保护素 骨性疾病 活化培养 前列腺素 实验检测 青藤碱 制备 预防 治疗
【说明书】:

发明属于生物医药技术领域,具体涉及间充质干细胞的活化方法和干细胞制剂及其应用。本发明所提供的间充质干细胞的活化方法,包括:提供间充质干细胞,将所述间充质干细胞采用第一培养基进行第一培养,之后采用第二培养基进行第二培养;其中,所述第一培养基包含黄芪水提物,所述第二培养基包含青藤碱。经过实验检测,相对于活化前的间充质干细胞,由该活化方法进行活化培养后的间充质干细胞的骨保护素(OPG)表达水平明显增多,RANKL和前列腺素E2(PGE2)的表达水平明显降低。因而,推测通过本发明活化方法得到的间充质干细胞或包含该间充质干细胞的干细胞制剂可应用于制备预防或治疗骨性疾病药物中。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域,具体涉及间充质干细胞的活化方法和干细胞制剂及其应用。

背景技术

当前,骨性关节炎、类风湿性关节炎和骨质疏松症等骨性疾病的发病率显着增加,临床上用于治疗这类疾病的手段有采用止痛药、硫酸软骨素或结合中药制剂等进行药物治疗,或采用关节置换术等。近年来,干细胞治疗作为一种治疗手段也逐渐应用于骨性疾病的临床研究中,然而,其效果并不十分理想。

发明内容

有鉴于此,本发明的主要目的在于提供一种间充质干细胞的活化方法,本发明的另一目的在于提供一种间充质干细胞制剂,旨在为制备治疗骨性疾病药物提供新途径。

为了实现上述发明目的,本发明的一方面,提供了一种间充质干细胞的活化方法,包括:提供间充质干细胞,将所述间充质干细胞采用第一培养基进行第一培养,之后采用第二培养基进行第二培养;

其中,所述第一培养基包含黄芪水提物,所述第二培养基包含青藤碱。

本发明的另一方面,提供了一种间充质干细胞制剂,包括:上述活化方法得到的间充质干细胞,以及药学上可接受的辅料、载体和添加剂中的至少一种。

本发明的又一方面,提供了前述活化方法得到的间充质干细胞或上述间充质干细胞制剂在制备预防或治疗骨性疾病药物中的应用。

综上所述,本发明依次采用包含黄芪水提物的第一培养基和包含青藤碱的第二培养基对间充质干细胞进行活化培养。经过实验检测,相对于活化前的间充质干细胞,由该活化方法进行活化培养后的间充质干细胞的骨保护素(OPG)表达水平明显增多,RANKL(核因子κB受体活化因子配体)和前列腺素E2(PGE2)的表达水平明显降低。OPG的表达水平增加,RANKL和PGE2的表达水平降低,可抑制破骨细胞的形成和活化,促进间充质干细胞对骨损伤部位的修复效果。因而,通过本发明活化方法得到的间充质干细胞或包含该间充质干细胞的干细胞制剂可应用于制备预防或治疗骨性疾病药物中,尤其适用于制备抑制骨吸收药物。

附图说明

图1为本发明测试例1中采用ELISA法检测的各组间充质干细胞中RANKL表达水平的柱状图;

图2为本发明测试例1中采用ELISA法检测的各组间充质干细胞中PGE2表达水平的柱状图;

图3为本发明测试例1中采用RT-PCR法检测的各组间充质干细胞中RANKL、PGEES3、OPG表达水平的柱状图。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白,以下结合实施例,对本发明进行进一步详细说明。应当理解,此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明,并不用于限定本发明。

为了给制备治疗骨性疾病药物提供新途径,一方面,本发明实施例提供一种间充质干细胞的活化方法,包括:提供间充质干细胞,将所述间充质干细胞采用第一培养基进行第一培养,之后采用第二培养基进行第二培养;

其中,所述第一培养基包含黄芪水提物,所述第二培养基包含青藤碱。

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