[发明专利]猪塞内卡病毒新型基因工程疫苗，其制备方法与应用

权利要求书

1.一种免疫组合物的制备方法，其特征在于包含以下步骤：

S1、将猪塞内卡病毒结构蛋白VP3、VP0的编码基因以及猪塞内卡病毒结构蛋白VP1、VP2、VP4的表达框均克隆到同一pFastBac Dual穿梭载体上，得到重组穿梭载体；

S2、将重组穿梭载体转化到含有杆状病毒基因组质粒的DH10Bac菌中，重组穿梭载体中目的基因表达框定向插入杆状病毒基因组质粒中，获得含有目的基因表达框的重组杆状病毒基因组质粒；

S3、将重组杆状病毒基因组质粒转染昆虫细胞获得重组杆状病毒；

S4、将获得的重组杆状病毒接种昆虫细胞，在反应器中大规模生产重组猪塞内卡病毒结构蛋白；

S5、将S4步骤中获得的重组猪塞内卡病毒结构蛋白加入到佐剂中，即得所述免疫组合物；

所述VP3蛋白的编码基因如SEQ ID NO:1所示；

所述VP1蛋白的表达框的序列如SEQ ID NO:21所示，其中编码基因如SEQ ID NO:4所示；

所述VP2蛋白的表达框的序列如SEQ ID NO:20所示，其中编码基因如SEQ ID NO:3所示；

所述VP4蛋白的表达框的序列如SEQ ID NO:22所示，其中编码基因如SEQ ID NO:5所示；

所述VP0蛋白的编码基因如SEQ ID NO:2所示。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述VP3蛋白、VP1蛋白、VP2蛋白、VP4蛋白、VP0蛋白分别如SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:19、SEQ IDNO:16所示。

3.由权利要求1~2中任意一项所述方法制备的免疫组合物在制备猪塞内卡病毒的检测试剂，在生产用于在受试动物中诱导针对猪塞内卡病毒抗原的免疫反应的药剂，或者，在生产用于预防动物受猪塞内卡病毒感染的药剂中的用途。

4.由权利要求1~2中任意一项所述方法制备的免疫组合物在制备猪塞内卡病毒新型基因工程疫苗中的用途。