[发明专利]一种均相化学发光检测试剂盒及其应用

说明书

本发明涉及一种均相化学发光检测试剂盒及其应用。所述试剂盒包括：供体试剂，其包括供体微球，所述供体微球能够在激发状态下生成活性氧，且所述供体微球表面包被有标记物；和，受体试剂，其包括受体微球，所述受体微球能够与活性氧反应产生可检测的化学发光信号，且所述受体微球表面包被有生物分子，所述生物分子能够与待测目标分子特异性结合；其中，所述受体微球的粒径等于供体微球的粒径。试剂盒中的供体微球的粒径等于受体微球的粒径，提高了该试剂盒的精密性和灵敏度。

技术领域

本发明属于化学发光技术领域，具体涉及一种均相化学发光检测试剂盒及其应用。

背景技术

迄今为止，生物体内微量生物活性物质的测定方法已经历了由放射免疫、分析(RIA)、荧光免疫分析(FIA)、酶联免疫分析(EIA)以及化学发光分析等诸阶段。这一衍变过程主要是基于对检测方法的敏感性、准确性、以及操作简捷性需求的不断提高而决定的。

化学发光分析法是一种利用化学发光物质发射的光波进行检测的方法。化学发光物质作为标记应用于核酸检测与免疫检测中。例如，可通过多种途径将特异结合对中的某一分子与发光物质结合形成发光复合物。该复合物可与样品中被检测物(特异结合对中的另一分子)反应，分配于固相与液相中，且分配比例与检测物的量相关。通过测定固相或液相中发光量，即可得出样品中检测物的相应浓度。

化学发光分析中供体微球和受体微球的发光效率决定了化学发光分析法的检测灵敏度。为了提高供体微球和/或受体微球的发光效率，本领域一般采用提高供体微球中染料的感光效率和/或受体微球中发光化合物的接受光的效率和发光效率的方法。

虽然采用本领域所述方法可在一定程度上提高化学发光检测法的检测灵敏度，但是检测量程或线性范围却较窄。因此，目前需要开发一种能在现有技术基础上进一步提高发光效率的试剂盒，不仅具有较高的灵敏度，而且检测量程又较宽。

发明内容

本发明针对现有技术的不足提供一种用于均相化学发光检测的试剂盒，将该试剂盒用于均相化学发光检测时不仅具有较高的灵敏度，而且具有较宽的检测量程。

为此，本发明第一方面提供了一种均相化学发光检测试剂盒，其包括：

供体试剂，其包括供体微球，所述供体微球能够在激发状态下生成活性氧，且所述供体微球表面包被有标记物；和，

受体试剂，其包括受体微球，所述受体微球能够与活性氧反应产生可检测的化学发光信号，且所述受体微球表面包被有生物分子，所述生物分子能够与待测目标分子特异性结合；

其中，所述受体微球的粒径等于供体微球的粒径。

在本发明的一些具体实施方式中，所述供体微球与受体微球的平均粒径均为20nm-350nm，优选为50nm-300nm，更优选为100nm-250nm，最优选为180nm-220nm。

在本发明的一些实施方式中，所述供体微球包括第一载体，所述第一载体的内部填充有敏化剂，所述第一载体的表面化学键合标记物。

在本发明的另一些实施方式中，所述第一载体的表面没有包被或连接有多糖物质，其直接化学键合标记物。

在本发明的一些实施方式中，所述标记物为亲和素。

在本发明的另一些实施方式中，所述亲和素选自卵白亲和素、链霉亲和素、卵黄亲和素、中性亲和素和类亲和素，优选选自中性亲和素或链霉亲和素。

在本发明的一些实施方式中，所述亲和素通过氨基与所述第一载体表面的醛基反应形成席夫碱的方式化学键合在所述第一载体的表面。

在本发明的另一些实施方式中，所述第一载体的表面带有键合官能团，所述键合官能团用于将标记物化学键合在所述第一载体的表面。