[发明专利]一种核桃青皮胡桃醌提取物的制备方法及其在中药材根腐病防治中的应用

说明书

本发明公开一种核桃青皮胡桃醌提取物的制备方法，包括以下步骤：（1）预处理：取核桃青皮，通风晾干，切忌颜色变黑，烘干，冷却后粉碎，过筛，得到核桃青皮粉；（2）乙醚提取：将核桃青皮粉加入乙醚中回流提取，过滤，重复3次，合并滤液，滤液浓缩得到乙醚浓缩液；（3）核桃青皮的粗提取：得到核桃青皮粗提物；（4）将得到的核桃青皮粗提物采用大孔吸附树脂柱层析法联合葡聚糖凝胶柱层析法予以分离纯化，得到核桃青皮胡桃醌提取物。本发明回收废弃的核桃青皮为原料，提取方法操作简单，变废为宝，提高了其利用率，且制备的核桃青皮胡桃醌提取物纯度高，对防治中药材根腐病具有明显的效果，而且药效持续时间长。

技术领域

本发明属于核桃青皮提取物技术领域，具体涉及一种核桃青皮提取物的制备方法及其在中药材根腐病防治中的应用。

背景技术

商洛，地处秦岭南麓，具有丰富的中药材资源，尤其是丹参、连翘、桔梗、黄芩和五味子这五种药材因其地道、质优、量大，在全国享有盛名，被称为“五大商药”。但是研究表明，根腐病是中药材生长过程中一类常见的毁灭性土传病害，素有“植物癌症”之称。特别是在以根茎类入药的多年生中草药上，往往积重难返、危害严重、难以根治，而且涉及药材种类广、致病菌繁杂，可直接导致药材产量和品质的大幅降低，造成重大经济损失。因此，合理防控中草药根腐病，是保障其可持续发展的重要环节，这已经成为制约“五大商药”乃至商洛中药产业发展的瓶颈。

核桃青皮，又名青龙衣，为胡桃科植物胡桃楸(Juglans Mandshurica M.)和胡桃(Juglans Regial L.)的未成熟果实的绿色外果皮，主产于东北、山东、河北等地，自古以来一直作为民间常用中药材，辛、苦、涩、平，有清热解毒、祛风疗癣、止痛止痢等广泛的药用价值。商洛作为全国著名的核桃之乡，素有“中国核桃之都”之美誉，年产量为全国第一。与此同时，每年都有大量的核桃青皮被倒入田野、河流或者田地，这在一定程度上不仅污染了河流也带来了严重的环境问题。如果能从这些废弃物中提取出防治中药材病虫害的活性成分，不但能够解决大量的核桃青皮堆积问题，实现“变废为宝”，而且也能有效防治中草药病虫害，一举两得。中国专利CN 105994389 A中公开了一种核桃青皮提取物的制备方法及其在烟草蚜虫病害中的应用，对烟蚜的杀虫率高，但是，该方法得到的核桃青皮提取物对于中药材根腐病防治的效果差。

发明内容

针对现有技术的缺陷，本发明提供一种核桃青皮提取物的制备方法，得到的核桃青皮提取物在中药材根腐病防治中的具有较好的效果。

一种核桃青皮胡桃醌提取物的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）预处理：取核桃青皮，通风晾干，切忌颜色变黑，然后在80-90℃下烘干3-4h，冷却后粉碎，过60-100目筛，得到核桃青皮粉；

（2）乙醚提取：按照核桃青皮粉和乙醚的体积比为1：（2-5），将核桃青皮粉加入乙醚中，在2-5℃下回流提取2h，过滤，重复3次，合并滤液，滤液浓缩得到乙醚浓缩液；

（3）核桃青皮的粗提取：将乙醚浓缩液用2（w/v）%的氢氧化钠水溶液萃取，萃取液用2（v/v）%盐酸溶液中和至中性，再用乙醚萃取，得到的乙醚萃取液用水洗涤至中性，挥干乙醚，按照体积比1:30加入氯仿的乙醇水溶液中，在30℃下超声回流提取30min，过滤，重复超声提取3次，合并滤液，滤液在45℃下旋转蒸发浓缩，然后将浓缩物真空冷冻干燥得到核桃青皮粗提物；

（4）将得到的核桃青皮粗提物采用大孔吸附树脂柱层析法联合葡聚糖凝胶柱层析法予以分离纯化，得到核桃青皮胡桃醌提取物。

优选地，所述氯仿的乙醇水溶液中，氯仿的体积浓度为70-90%，乙醇的体积浓度为1%。

优选地，所述超声的功率为180-220W。

优选地，步骤（4）中所述采用大孔吸附树脂柱层析法联合葡聚糖凝胶柱层析法予以分离纯化具体包括以下步骤：