[发明专利]一种枯草芽孢杆菌制剂及制备方法

说明书

本发明公开了一种枯草芽孢杆菌制剂及制备方法。以豆腐黄浆水为培养基发酵制备发酵液，按质量比10wt%的脱脂奶粉，10wt%麦麸以及80wt%的枯草芽孢杆菌SB13发酵液，通过冷冻干燥获得。该菌制剂中菌SB13的存活率高达97.71%。该菌制剂在人工模拟胃液和胰液环境中37℃处理4h后，菌存活率保留15.61%和43.80%，内切葡聚糖酶活力保存率分别为34.17%和42.00%，检测到的菌落数分别为2.2和5.65*10⁷（cfu/ml)。该菌制剂对猪饲料、鸡饲料和牛饲料有显著的糖化作用，添加至猪、鸡和牛等畜禽饲料中，有望提高畜禽对饲料的吸收利用效率。

技术领域

本发明属于菌制剂技术领域，具体涉及一种枯草芽孢杆菌菌制剂及制备方法。

背景技术

枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）因具有抗逆性强、生长周期短、对营养要求不高、易储存等独特的生物学特性而被广泛应用。该菌因无污染、无残留、不产生抗药性等特点已在我国得到批准可用作饲料添加剂的一类益生细菌。由于有着高效的胞外蛋白分泌性能、良好的基因表达基础、极低的营养要求、储存简易等独特的生物学特性，被认为是很有生物炼制能力的工业潜力菌种。该菌进入动物肠道能迅速萌发成具有新陈代谢作用的营养型细菌,调节肠道菌群平衡,增强动物机体免疫力,有些枯草芽孢杆菌可分泌较高的内切葡聚糖酶，水解或膨胀部分饲料中的纤维素类物质或衍生物，提高动物对高纤维饲料的吸收利用率，降低饲料成本。

豆腐黄浆水，是豆腐在生产过程中形成的豆腐沥水，其产生量是大豆干重的3-5倍。豆腐黄浆水固形物含量约占1%，主要由可溶性蛋白质、低聚糖、维生素、脂类、微量元素等组成。豆腐黄浆水是豆腐废水的主要组成部分，对豆腐黄浆水进行开发利用，则可以减少其对环境的污染，帮助企业节约处理污水产生的高成本的同时，产生出附加的有价值的产品。

本发明以豆腐黄浆水为发酵原料，生产出枯草芽孢杆菌发酵液，通过最佳芽孢形成率发酵工艺参数筛选、保护剂和载体、加入量以及干燥工艺筛选，获得枯草芽孢杆菌菌制剂及制备工艺，为枯草芽孢杆菌更好的应用于畜禽养殖，提高饲料中纤维素的糖化过程，提高畜禽对饲料的吸收利用效率提供帮助。

发明内容

本发明的目的在于提供一种枯草芽孢杆菌制剂及制备方法。本发明的枯草芽孢杆菌加工成粉末，其中的菌存活率的提高，为菌制剂更好的应用于畜禽饲料，提高饲料中纤维素的糖化作用，提高畜禽对饲料的吸收利用效率有帮助。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种枯草芽孢杆菌制剂，原料包括枯草芽孢杆菌SB13发酵液，脱脂奶粉，麦麸；按重量百分数计包括：枯草芽孢杆菌SB13发酵液 80%、脱脂奶粉 10%、麦麸 10%。

一种枯草芽孢杆菌制剂的制备方法，包括以下步骤：

（1）枯草芽孢杆菌SB13母液的制备：将20%甘油保存的枯草芽孢杆菌SB13按1wt %的接种量接种入基础培养基中（蛋白胨10 g/L、牛肉膏5 g/L、氯化钠5 g/L、pH7.0，121℃高压灭菌25min），37℃ 160r/min恒温培养24h，得菌SB13母液；

（2）枯草芽孢杆菌SB13发酵液的制备：以豆腐黄浆水，加浓度为10wt%的NaOH溶液调节豆腐黄浆水的pH值至7.0，121℃高压灭菌30min，按1wt %的接种量接种枯草芽孢杆菌SB13母液，160r/min，35℃恒温培养72h，获得芽孢含量大于90 %的枯草芽孢杆菌SB13发酵液；

（3）按质量百分比为步骤（1）制得的发酵液80%，脱脂奶粉 10%、麦麸 10%将三种原料混合均匀，采用-80℃预冷冻，温度-50℃，真空度23帕冷冻干燥工艺干燥48h，得枯草芽孢杆菌制剂。

上述步骤（3）中麦麸为经过研磨的过60目精细粉末。

一种枯草芽孢杆菌制剂在畜禽饲料中的应用。