[发明专利]一种EGCG的液质联用分析方法

权利要求书

1.一种EGCG的液质联用分析方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、样品采集：采集全血后离心，收集血浆，加入含抗坏血酸的水溶液，抗坏血酸终浓度为5mg/mL，混合均匀，获得血浆样品；

S2、样品预处理：步骤S1的血浆样品:内标工作液:乙腈按体积比8:5:50混匀，室温下高速离心，收集上清，加入三倍体积的体积比为10:90的甲醇:水溶液复溶，得到待测样品；所述内标工作液中内标物为甲苯磺丁脲；

S3、液质联用测定：

液相色谱测定条件为：色谱柱：Xbridge C18，进样器温度：4℃，洗针液：甲醇，流动相A：0.3％甲酸的水溶液，流动相B：0.3％甲酸的乙腈溶液，梯度洗脱，流速为1.0mL/min，进样量为7μL，分析时间3.20min；

所述梯度洗脱的程序为：

0-0.20min：90vt％流动相A+10vt％流动相B；

0.20-1.20min：5vt％流动相A+95vt％流动相B；

1.20-1.80min：5vt％流动相A+95vt％流动相B；

1.80-1.90min：90vt％流动相A+10vt％流动相B；

1.90-2.10min：90vt％流动相A+10vt％流动相B；

2.10-3.20min：90vt％流动相A+10vt％流动相B；

质谱条件为：电喷雾离子源(ESI)，负离子模式，扫描方式为多反应离子监测(MRM)；

喷雾电压为-4500V，喷雾温度为550℃；

雾化气种类GS1：50psi；

辅助气种类GS2：50psi；

气帘气种类CUR：30psi；

碰撞气种类CAD：Medium；

去簇电压(DP)：EGCG为-20.0V和内标为-37.0V；

碰撞电压(CE)：EGCG为-10.0V和内标为-10.0V；

入口电压(EP)：EGCG为-23.0V和内标为-43.0V；

碰撞室出口电压(CXP)：EGCG为-15.0V和内标为-15.0V；

用于定量分析的离子反应：EGCG为m/z457.1→m/z169.0和内标为m/z269.0→m/z105.9；

S4、定量分析：建立标准曲线，根据线性回归方程及待测样品检测所得的峰面积比值计算出血浆样品中EGCG的浓度。

2.如权利要求1所述的EGCG的液质联用分析方法，其特征在于，步骤S2中，所述甲苯磺丁脲工作液浓度为500ng/mL。

3.如权利要求1所述的EGCG的液质联用分析方法，其特征在于，步骤S2中，所述高速离心条件为10000g、10min。

4.如权利要求1所述的EGCG的液质联用分析方法，其特征在于，步骤S4中，所述标准曲线的建立包括以下步骤：

P1、以体积比为10:90的甲醇:水溶液为溶剂配制浓度梯度范围为50～10000ng/mL的EGCG标准溶液；

P2、加入内标工作液，混匀；

P3、液质联用测定，以EGCG标准溶液的浓度为横坐标，分析物和内标峰面积比值为纵坐标，用加权最小二乘法得线性回归方程y＝0.000264x+0.00944，R²＝0.9959。