[发明专利]一种提高国兰根状茎增殖和分化效率的方法

权利要求书

1.一种提高国兰根状茎增殖和分化效率的方法，其特征在于，包括如下步骤：

将根状茎接种至培养基上，培养，即可；所述根状茎为无污染、活力高的根状茎；所述根状茎的长度为0.8～1.2cm；所述根状茎用于增殖培养时切除顶端；所述根状茎用于分化培养时保留顶端；

所述培养基为增殖培养基或分化培养基；所述增殖培养基为MS培养基，所述增殖培养基中还添加有6-BA 1.0～2.0mg·L^-1，NAA 0.2～0.5mg·L^-1，AC 0.3～0.5g·L^-1，蔗糖30g·L^-1，卡拉胶7.0～8.0g·L^-1，硫酸铜2～4mg·L^-1；所述分化培养基为MS培养基，所述分化培养基中还添加有6-BA 1.5～3.0mg·L^-1，NAA 0.1～0.5mg·L^-1，蔗糖30.0g·L^-1，AC 0～0.05g·L^-1，卡拉胶7.0～8.0g·L^-1，硫酸铜4～6mg·L^-1。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述培养基在接种前进行灭菌操作。

3.根据权利要求2所述方法，其特征在于，所述灭菌操作的过程如下：将培养基于120～125℃下灭菌20～30分钟。

4.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述增殖培养基中6-BA的添加量为1.0mg·L^-1，NAA的添加量为0.5mg·L^-1，AC的添加量为0.5g·L^-1，蔗糖的添加量为30.0g·L^-1，卡拉胶的添加量为7.0g·L^-1，pH为5.8±0.2；所述分化培养基中6-BA的添加量为1.5mg·L^-1，NAA的添加量为0.5mg·L^-1，蔗糖的添加量为30.0g·L^-1，AC的添加量为0.05g·L^-1，卡拉胶的添加量为7.0g·L^-1，pH为5.8±0.2。

5.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述增殖培养基或分化培养基通过如下过程制备得到：吸取MS培养基的大量元素、微量元素、铁盐、维生素以及6-BA、NAA和硫酸铜母液放入烧杯中待用；将卡拉胶用水煮熔，加入蔗糖、母液和AC后定容，调节pH即得。

6.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述根状茎的接种量为8～15条或8～15块。

7.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述培养的条件为在荧光灯照射下培养50～60d，培养温度为24～27℃，光照强度为900～2100lx，光照时间为11～13h·d^-1。