[发明专利]一种靶向肿瘤纳米人工抗体的制备方法和用途在审
申请号: | 201910658380.0 | 申请日: | 2019-07-21 |
公开(公告)号: | CN110483683A | 公开(公告)日: | 2019-11-22 |
发明(设计)人: | 吕永琴;李燕;李媛 | 申请(专利权)人: | 北京化工大学 |
主分类号: | C08F220/54 | 分类号: | C08F220/54;C08F222/38;C08F220/34;C08F220/56;C08F220/06;A61K47/32;B82Y40/00 |
代理公司: | 11108 北京太兆天元知识产权代理有限责任公司 | 代理人: | 王宇<国际申请>=<国际公布>=<进入国 |
地址: | 100029 北京市*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 肿瘤标志物 人工抗体 循环肿瘤细胞 高灵敏度 功能单体 化学发光试剂盒 磁性纳米颗粒 荧光定量检测 亲和力常数 微流控芯片 选择性识别 靶向肿瘤 结合分子 拉曼光谱 纳米颗粒 稳定多肽 印迹技术 交联剂 全蛋白 整体柱 亲和力 抗体 凝胶 配比 捕获 制备 聚合 筛选 调控 检测 | ||
1.一种靶向肿瘤纳米人工抗体的制备方法,其特征在于,N-异丙基丙烯酰胺,N-叔丁基丙烯酰胺,十二烷基磺酸钠,带电功能单体,N,N'-亚甲基双丙烯酰胺作为交联剂、靶向肿瘤标志物作为模板分子,在引发剂作用下于水相中通过聚合后洗脱模板分子得到靶向肿瘤纳米人工抗体。
2.根据权利要求1所述靶向肿瘤纳米人工抗体的制备方法,其特征在于,所述靶向肿瘤标志物包括上皮细胞粘附分子、表皮生长因子受体、癌胚抗原、神经元特异性烯醇化酶、波形蛋白、酪氨酸酶、程序性死亡受体-1和程序性死亡受体-配体1、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4、淋巴细胞活化基因-3、T细胞免疫球蛋白域粘蛋白域蛋白-3、甲胎蛋白、糖类抗原12-5、糖类抗原19-9、鳞状细胞癌抗原、前列腺特异性抗原、人绒毛膜促性腺激素或其多肽片段,或泌素释放肽前体中的任意一种或几种。
3.根据权利要求1所述靶向肿瘤纳米人工抗体的制备方法,其特征在于,所述带电功能单体包括N-(3-氨基丙基)甲基丙烯酸、丙烯酸、甲基丙烯酸、1-乙烯基咪唑、N-(3-二甲氨基丙基)甲基丙烯酰胺、丙烯酰胺、双丙烯酰胺、(3-丙烯酰胺基丙基)三甲基氯化铵、N-(2-氨基乙基)丙烯酰胺中的任意一种或几种。
4.根据权利要求1所述靶向肿瘤纳米人工抗体的制备方法,其特征在于,N-异丙基丙烯酰胺的用量为5-60wt%,N-叔丁基丙烯酰胺的用量为5-50wt%,带电功能单体的用量为0.5-20wt%,N,N'-亚甲基双丙烯酰胺的用量为0.5-10wt%。
5.根据权利要求1所述靶向肿瘤纳米人工抗体的制备方法,其特征在于,聚合的方法为反相乳液聚合、沉淀聚合或自由基聚合中的任一种。
6.根据权利要求1所述靶向肿瘤纳米人工抗体的制备方法,其特征在于,所述引发剂为过硫酸铵或偶氮二异丁腈。
7.根据权利要求5所述靶向肿瘤纳米人工抗体的制备方法,其特征在于,氮气氛围下的聚合反应温度为20-70℃,聚合反应时间为3-36h。
8.根据权利要求1所述靶向肿瘤纳米人工抗体的制备方法,其特征在于,模板分子洗脱溶液为NaCl、柠檬酸钠、甘氨酸或十二烷基磺酸钠中的任意一种,或者通过改变温度和pH值实现模板分子的洗脱。
9.根据权利要求1所述靶向肿瘤纳米人工抗体的制备方法,其特征在于,纳米粒子人工抗体的粒径为10-3000nm。
10.一种靶向肿瘤纳米人工抗体的用途,其特征在于,根据权利要求1至9中任意一条所述方法制备的靶向肿瘤纳米人工抗体用于磁性纳米颗粒、整体柱或微流控芯片实现肿瘤标志物、循环肿瘤细胞以及外泌体的选择性识别捕获,并可通过高灵敏度拉曼光谱、荧光定量检测、ELISA试剂盒、化学发光试剂盒、试纸条、电化学传感器、免疫浊度、免疫层析、超声波检测、CT检测和核磁检测方法实现肿瘤标志物、循环肿瘤细胞以及外泌体的高灵敏度检测。
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