[发明专利]一株哈茨木霉固体发酵及其产品在马铃薯镰刀菌根腐病中的应用

权利要求书

1.一种哈茨木霉M-17的固体发酵方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1、菌种培养：将哈茨木霉M-17菌种接种到PDA固体平板上，黑暗条件下，25～28℃培养5～7d；

步骤2、固体发酵：将步骤1培养的木霉菌菌落用打孔器沿菌落边缘各打出菌饼，接种到灭菌的固体发酵培养基中，待菌丝长满培养基后即可。

2.根据权利要求1所述的哈茨木霉M-17固体发酵产物用于马铃薯镰刀菌根腐病的防治应用；所述的镰刀菌为木贼镰刀菌、接骨木镰刀菌、尖孢镰刀菌、茄病镰刀菌、锐顶镰刀菌中的至少一种。

3.根据权利要求1所述的一种哈茨木霉M-17的固体发酵方法，其特征在于，步骤1中PDA固体平板制作方法为：

1)先按以下配比称取培养基各组分：去皮马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂15～20g，蒸馏水1000ml；

2)土豆切成小块放入锅中，加水1000ml，在加热器上加热至沸腾，维持20～30min，用2层纱布趁热在量杯上过滤，滤渣弃取，滤液补充蒸馏水分到1000ml；

3)把滤液放入锅中，加入葡萄糖20g，琼脂15～20g，然后放在石棉网上，小火加热，并用玻棒不断搅拌，待琼脂完全溶解后，进行分装，121℃灭菌25～30min后自然冷却凝固备用。

4.根据权利要求1所述的一种哈茨木霉M-17的固体发酵方法，其特征在于，步骤2中固体发酵培养基组分为：中药粉30～70％、马铃薯全粉10～20％、玉米粉10～30％、木屑0～15％，马铃薯皮5～7％，加水量为以上组分质量的70～80％；灭菌条件为蒸汽灭菌，121～125℃，维持45～60min。

5.根据权利要求1所述的一种哈茨木霉M-17的固体发酵方法，其特征在于，步骤2中打孔器大小为Φ＝10mm；固体发酵培养条件为接种量10％，于25℃下静止培养3d，手工摇瓶后继续培养，培养温度27～30℃，培养时间7～10d。

6.根据权利要求1所述的一种哈茨木霉M-17的固体发酵方法，其特征在于，中药粉为甘草、板蓝根、葡萄酒皮渣中的一种或几种。

7.根据权利要求1所述的一种哈茨木霉M-17的固体发酵方法，其特征在于，中药粉组成为甘草0～100％、板蓝根0～100％、葡萄酒皮渣0～60％。