[发明专利]一种红树内生真菌来源的丁内酯类化合物及其制备方法与应用

说明书

本发明涉及一种红树内生真菌来源的丁内酯类化合物及其制备方法与应用。所述丁内酯类化合物具有化合物1‑3所示结构：

技术领域

本发明属于红树植物内生真菌次级代谢产物领域，具体涉及一种红树内生真菌来源的丁内酯类化合物及其制备方法与应用。

背景技术

本发明所述红树尖瓣海莲内生真菌TGM112(CGMCC No.16499)，已在先前发明专利申请(申请号：201811476397.6、201811478315.1)中公开，先前申请人从真菌TGM112中分离获得系列抗虫活性的混元萜类化合物及异香豆素类化合物(J.Nat.Prod.,2019,82,5,1155-1164)。本发明公开从真菌TGM112中分离获得的三个结构新颖的丁内酯来化合物。

发明内容

本发明提供一种红树内生真菌来源的丁内酯类化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于所述丁内酯类化合物具有化合物1-3所示结构：

本发明的另一实施方案提供一种同时制备上述化合物1-3的方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)配制种子培养基，将TGM112菌株接入种子培养基，26～28℃，培养3～4天得种子培养液；

(2)将步骤(1)得到的种子培养液接入发酵培养基中，26～28℃静置培养21～24天得发酵物；

(3)将步骤(2)得到的发酵物中的发酵液和菌体分离，发酵液和菌体分别用等体积的乙酸乙酯萃取3～5次，合并萃取液后减压浓缩得到浸膏；

(4)步骤(3)得到的浸膏经过减压硅胶柱层析，采用石油醚-乙酸乙酯按100:0、90:10、80:20、70:30、60:40，50:50、40:60、30:70、20:80、10:90、0:100梯度洗脱，每个梯度收集两个柱体积，合并50:50和40:60梯度洗脱得到的馏分浓缩后经正相硅胶柱层析，洗脱剂为石油醚:乙酸乙酯＝10:1-3:1，再经高效液相色谱HPLC制备，色谱柱为Agilent C18,9.4×250mm，7μm，流速为2mL/min，流动相为CH₃CN:H₂O＝45:55，最终得到化合物1、2、3。

其中所述洗脱剂或流动相的比例均为体积比；所述种子培养基中含有葡萄糖1.5％–3.0％、酵母膏0.1％–0.5％、蛋白胨0.1％–0.5％、粗海盐0.11％–0.6％、适量的水；所述发酵培养基中含有葡萄糖1.6％–3.5％、酵母膏0.1％–0.5％、蛋白胨0.1％–0.5％、粗海盐0.11％–0.6％、适量的水；上述百分比均为重量百分比；所述种子培养基和发酵培养基均需120℃灭25–30分钟。

本发明的另一实施方案提供上述化合物1-3或其药学上可接受的盐在制备治疗和/或预防由细菌感染引起的疾病药物中的应用。所述细菌优选金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus ATCC 25923。

本发明的另一实施方案提供上述化合物1-3或其药学上可接受的盐在防治致倦库蚊Culex quinquefasciatus中的应用。

本发明的另一实施方案提供一种药物组合物，其特征在于以本发明化合物1-3或其药学上可接受的盐作为活性成分。

本发明提供的另一实施方案提供上述药物组合物，还可包含其他抗菌或杀虫药物；也可以包含药学上可接受的辅料(优选药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂)。

本发明中术语“药学上可接受的盐”是指非毒性的无机或有机酸和/或碱的加成盐，可参见“Salt selection for basic drugs”,Int.J.Pharm.(1986),33,201–217。

附图说明