[发明专利]一种裸花紫珠药效标准提取物及其制备方法

权利要求书

1.一种裸花紫珠药效标准提取物，其特征在于总苯丙烯酸类，黄酮类活性成分含量在92％～98％，其中苯丙烯酸类：黄酮类化合物百分含量比值为70±5％：30±10％；苯丙烯酸类：黄酮类化合物数目比值为25～35：8～16。

2.根据权利要求1所述的一种裸花紫珠药效标准提取物的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)将裸花紫珠药材粉末，用8～20倍量的10％～90％的乙醇水溶液混合，热回流提取次数1～4次，每次提取0.5h～2h，所得提取液合并；

(2)合并后的提取液用苯乙烯型非极性吸附树脂纯化，上样量为每1g干树脂上样总苯丙烯酸类、黄酮类5～15mg/g，上样浓度总苯丙烯酸类、黄酮类1～4mg/ml，吸附流速为2～5bv/h，洗脱量为2～5bv/h，洗脱浓度5～95％乙醇，得大孔树脂分离纯化提取物；

(3)大孔树脂分离纯化后提取物再经水饱和乙酸乙酯萃取1～3次，回收乙酸乙酯，得乙酸乙酯萃取物；

(4)乙酸乙酯萃取物再经制备HPLC分离，除去小分子量的大极性成分和极性小的萜类成分，制备HPLC色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱，其规格为外径10mm～300mm×柱长250mm～1500mm，填料粒径5μm～50μm，流动相体系为甲醇～甲酸水溶液或甲醇～乙酸水溶液或甲醇～磷酸水溶液或乙腈～甲酸水溶液或乙腈～乙酸水溶液或乙腈～磷酸水溶液，梯度洗脱，采用DAD检测器检测，210nm和250～350nm双波长检测，收集总苯丙烯酸类，黄酮类活性成分洗脱液；

(5)总苯丙烯酸类，黄酮类活性成分洗脱液，减压回收溶剂，65℃真空干燥，得到裸花紫珠叶药效标准提取物。

3.根据权利要求1所述的一种裸花紫珠药效标准提取物的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)将裸花紫珠药材粉末，用10～12倍量的60％～90％的乙醇水溶液混合，热回流提取次数3次，每次提取1h，所得提取液合并；

(2)合并后的提取液用AB-8树脂纯化，上样量为每1g干树脂上样总苯丙烯酸类、黄酮类10mg/g，上样浓度总苯丙烯酸类、黄酮类2.942mg/ml，吸附流速为3bv/h，洗脱量为3bv/h，洗脱浓度80％乙醇，得大孔树脂分离纯化提取物；

(3)大孔树脂分离纯化后提取物再经等量水饱和乙酸乙酯萃取1次，回收乙酸乙酯，得乙酸乙酯萃取物；

(4)乙酸乙酯萃取物再经制备HPLC分离，制备HPLC色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱，其规格为外径150mm×柱长600mm，填料粒径10μm，流动相A相为甲醇，B相为0.2％醋酸水溶液，梯度洗脱，流速300ml/min，柱温为室温，进样量70ml。洗脱程序如下所示：

采用DAD检测器检测，210nm和250～350nm双波长检测，收集总苯丙烯酸类，黄酮类活性成分洗脱液；

(5)总苯丙烯酸类，黄酮类活性成分洗脱液，减压回收溶剂，65℃真空干燥，得到裸花紫珠叶药效标准提取物。

4.根据权利要求2或3所述的一种裸花紫珠药效标准提取物的制备方法，其特征在于大孔树脂分离纯化提取物中总苯丙烯酸类，黄酮类纯度大于60％。

5.根据权利要求2或3所述的一种裸花紫珠药效标准提取物的制备方法，其特征在于乙酸乙酯萃取物中总苯丙烯酸类，黄酮类纯度达到80％以上。