[发明专利]一种牛大力多糖的制备方法及应用

说明书

本发明公开了一种牛大力多糖的制备方法以及应用，涉及天然产物多糖，旨在解决现有技术中牛大力多糖提取工艺得率均较低，且纯度还达不到药物或保健品添加剂的要求。所述制备方法，包括以下步骤：(1)牛大力粉通过超临界CO₂萃取，得牛大力萃余物；(2)用等质量的水浸泡萃余物，水中添加原料质量分数0.5～1.0％的复合酶，复合酶中各组分比例为纤维素酶：木聚糖酶：蛋白酶＝1～3:3～1:2～4；(3)对步骤(2)的酶解混合物用水进行连续逆流萃取，获得萃取液；(4)萃取液过滤除杂后用大孔树脂吸附，过滤，保留截留液，截留液真空浓缩至原体积10～20％；(5)干燥：干燥截留浓缩液，即得牛大力多糖。所述制备方法得到的牛大力多糖可应用于制备治疗急性肺损伤药物。

技术领域

本发明涉及天然产物多糖的制备以及应用，更具体地说，尤其涉及一种牛大力多糖的制备方法及应用。

背景技术

牛大力(Millettia Speciosa Champ.)为豆科蝶形花亚科崖豆藤属植物美丽崖豆藤的干燥块根，两广地区广泛种植，常用于药膳、药酒，具有润肺补虚、活络壮筋、止咳清肺之功效，为岭南地区著名的药食两用植物。牛大力已作为主要原料应用于强力健身胶囊等多种中成药的生产，临床用于治疗肺炎、慢性支气管炎、病后体虚、腰肌劳损等慢性疾病。牛大力具有润肺、清肺功能及治疗肺炎效果显著，但其作用活性成分及相关分子机制还不明确。

牛大力含有香豆素、生物碱和糖类等有效成分，现代药理学研究证实牛大力具有抗氧化、抗炎、免疫调节、保肝等多种药理作用。研究发现牛大力水提物具有一定的抗运动性疲劳作用，可修复射线损伤的脾脏和胸腺；牛大力对环磷酰胺免疫抑制小鼠具有免疫增强作用，提高模型小鼠体质量、脾脏指数及胸腺指数，增加模型小鼠白细胞数目和单核巨噬细胞的吞噬功能；牛大力水提物对急、慢性炎症均有抑制作用。研究表明牛大力总黄酮对急性肺损伤模型小鼠具有明显的抗炎作用，抑制肺组织中白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)炎症介质的生成，还具有一定的抗氧化作用。但尚未见牛大力中多糖成分抵抗急性肺损伤的相关研究。

天然产物中多糖具有多种生物活性且毒副作用小等优点，如抗炎、增强免疫、抗氧化、降血糖等，越来越受到研究者的青睐。目前，针对牛大力多糖提取分离的研究报道还很少。例如，除了采用传统的水提醇沉法以外，专利公开号CN109134685A的发明专利还公开了一种采用高压均质技术和微滤技术从牛大力中提取分子量小于500Da多糖的方法，可一定程度上提高纯度，但多糖得率得不到保证。文献《牛大力多糖酶法提取工艺优化及其抗氧化活性》报道单用纤维素酶酶解提取牛大力多糖成分，文献《双指标优化微波酶法辅助牛大力薯中多糖提取》使用微波辅助果胶酶提取牛大力薯中多糖。这些牛大力多糖提取工艺得率均较低，且纯度还达不到药物或保健品添加剂的要求，因此，探讨一种牛大力多糖得率及纯度均较高的提取工艺，对于开发牛大力这一珍贵中草药资源、提高其应用价值非常重要。

发明内容

本发明的第一个目的在于提供一种牛大力多糖的制备方法，该方法获得的多糖得率、纯度高，操作简单，适合于放大化生产。

为实现本发明的第一个目的，提供如下的技术方案：一种牛大力多糖的制备方法，包括以下步骤：

(1)除杂:牛大力粉通过超临界CO₂萃取，获得牛大力萃余物；

(2)酶解:用等质量的水浸泡牛大力萃余物，水中添加原料质量分数0.5～1.0％的复合酶，复合酶中各组分比例为纤维素酶:木聚糖酶:蛋白酶＝1～3:3～1:2～4；

(3)提取:对步骤(2)的酶解混合物进行连续逆流萃取，获得萃取液；

(4)吸附分离：萃取液过滤除杂后用大孔树脂吸附，过滤，保留截留液，截留液真空浓缩至原体积10～20％；

(5)干燥：干燥截留浓缩液，即得牛大力多糖。