[发明专利]一种用于细胞保存的组合物;其含水制剂及其应用

说明书

本发明公开了一种用于细胞保存的组合物，包含该组合物的含水制剂，及该含水制剂在流式细胞术细胞检测前生物样本保存中的应用，用于细胞保存的组合物包括如下组分：磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、氯化钠、氯化钾、右旋糖酐40、四咪唑盐酸盐、多聚醛类、抗凝剂，其中，磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、氯化钠、氯化钾、右旋糖酐40、四咪唑盐酸盐、多聚醛类、抗凝剂的质量比为0.2∶1.4∶8‑9∶0.2∶5‑25∶25‑50∶25∶20‑30；本发明的组合物将磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、氯化钠、氯化钾、右旋糖酐40、四咪唑盐酸盐、多聚醛类、抗凝剂复配使用，能够有效、稳定地保存生物样本长达60天，为检测或诊断前样本处理提供了极其重要的保障。

技术领域

本发明涉及细胞保存技术领域，特别是涉及一种用于细胞保存的组合物，包含该组合物的含水制剂，及该含水制剂在流式细胞术细胞检测前生物样本保存中的应用。

背景技术

流式细胞术(Flow Cytometry，FCM)是当代最先进的细胞定量分析技术，具有快速、高精度、多参数等优点。FCM在临床及科研领域都发挥着重要作用，特别在临床体外诊断(In Vitro Diagnostic，IVD)已有非常广泛和深入的应用，成为最主流的检测手段之一，其临床应用包括：免疫学、血液学、临床肿瘤学、造血干细胞移植等；目前是白血病、淋巴瘤等恶性疾病临床诊断的金标准，并在药物敏感性筛选和发病机理研究等方面发挥着重要作用。

用于FCM上机检测的生物样本，一般为外周血、骨髓或其他组织样本。在获取生物样本后到上机检测前，需要对生物样本进行妥善保存。细胞在离开人体后，由于环境发生变化，细胞相关的物理化学特性和各项生物标志物都有可能随之发生改变，进而影响检测结果，甚至影响诊断和进一步地医疗处理方案。因此，对生物样本中的细胞进行恰当保存、保护，保证细胞具有与初始状态最接近的良好状态，是检测或诊断前样本处理中极其重要的步骤。

目前，对于FCM检测前专用的细胞保存技术研究相对较少，总体而言，保存技术需要解决的主要问题包括：(1)维持细胞生物标志物，特别是细胞表面标志物的稳定状态；(2)能够在保证检测或诊断准确度的基础上，延长样本保存时间；(3)保存试剂的配方更易于配制，成本更低，操作更方便。

申请公布号CN 107091799A公开了“一种血液细胞稳定剂”，包括A液和B液，其中A液包括以下组分：抗凝剂、磷酸酶抑制剂、蛋白酶抑制剂；B液包括以下组分：醛类聚合物、碱性盐、缓冲剂；其中，A液和B液按照0.5-2∶0.5-2的体积比混合。上述血液细胞稳定剂具有保护组织细胞的作用，对蛋白质、酶等缓慢固定的化学物质，具有稳定血液细胞、保持血液细胞原有的形态、维持血液细胞原有的物理性质，能够很好地固定血液中的细胞；但是，上述的血液细胞稳定剂需要A剂和B剂的分开存放，在使用前再进行混合，给使用带来不便；另外，上述的血液细胞稳定剂可保存血液仅192小时，保存时间较短，限制了应用范围。

发明内容

为了解决目前的细胞保存液可保存细胞时间短且A剂、B剂需要分开存放的问题，本发明的目的是提供一种用于细胞保存的组合物；另外，本发明还提供了包含该组合物的含水制剂及该含水制剂在流式细胞术细胞检测前生物样本保存中的应用。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

本发明的第一方面，提供一种用于细胞保存的组合物，包括如下组分：磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、氯化钠、氯化钾、右旋糖酐40、四咪唑盐酸盐、多聚醛类、抗凝剂，其中，磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、氯化钠、氯化钾、右旋糖酐40、四咪唑盐酸盐、多聚醛类、抗凝剂的质量比为0.2∶1.4∶8-9∶0.2∶5-25∶25-50∶25∶20-30。

优选的是，所述的磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、氯化钠、氯化钾、右旋糖酐40、四咪唑盐酸盐、多聚醛类、抗凝剂的质量比为0.2∶1.4∶9∶0.2∶5∶25∶25∶30。