[发明专利]一种铁皮石斛粗多糖提取方法及多糖含量检测方法

说明书

本发明公开了一种铁皮石斛粗多糖提取方法及多糖含量检测方法，包括如下步骤：取仿野生林下铁皮石斛鲜条切段，恒温烘干；粉碎成粉，加水热提，获得铁皮石斛多糖提取液，蒸发浓缩；离心机离心处理；取上清液加入乙醇静置后离心处理获取沉淀冻结；真空冷冻干燥研磨成粉状即得。本发明采用纯天然新鲜仿野生林下铁皮石斛进行粗多糖提取，采用本发明的提出方法提取多糖可以更大程度的提取铁皮石斛中的多糖，提取效率更高，纯度更高。

技术领域

本发明涉及植物活性成分提取技术领域，具体为一种铁皮石斛粗多糖提取方法及多糖含量检测方法。

背景技术

铁皮石斛为兰科石斛属多年生草本植物，其主要活性成分是石斛多糖，其具有较好的保健功能，有抗氧化、缓解疲劳，提高免疫力等功效。

目前铁皮石斛多糖的提取方法主要有：传统热水浸提法、超声波辅助提取法、微波辅助提取法、酶辅助提取法、闪提法、湿法超微粉碎辅助提取法、超临界辅助提取法等。传统热水浸提法操作简单，对相关人员及设备要求不高，因此使用较为广泛。但是，传统热水浸提法多是采用干铁皮石斛，材料活性有所降低，而传统方法的料液比和提取温度不能达到最大程度的提取。

因此，提出一种能够提取多糖含量高、提取效率高、纯度高的铁皮石斛粗多糖提取方法并进行多糖含量检测的方法成为必要。

发明内容

针对以上问题，本发明提供了一种铁皮石斛粗多糖提取方法及多糖含量检测方法。

根据本发明的一个目的，本发明提供如下技术方案：

一种铁皮石斛粗多糖提取方法，包括如下步骤：

S1，原料选择和处理：

S101，取仿野生林下铁皮石斛鲜条切段，每段长度约0.5-1.0cm；

S102，称取铁皮石斛鲜条段300.0g于60℃恒温烘干2-3天；

S103，将烘干好的铁皮石斛粉碎成粉，过100目筛子，备用；

S2，多糖提取

S201，采用分析天平准确称取制备好的铁皮石斛粉25.0000g于5000ml烧杯中，加入2000ml超纯水，95-100℃加水热提2h，获得铁皮石斛多糖提取液并采用过滤装置六层纱布进行过滤，

S202，再加入相同体积的超纯水重复提取，依次提取三次多糖提取液并进行过滤；

S3，提取液处理

S301，合并上述三次提取并经过滤的多糖提取液，在60℃旋转蒸发浓缩至500ml左右；

S302，冷却至室温，离心机4500r/min离心处理20min；

S4，多糖纯化

S401，取上清液加入4倍体积95％的乙醇，于4℃静置12h；

S402，离心机4500r/min离心处理20min，获取沉淀于-80℃冻结；

S403，已冻结沉淀真空冷冻干燥3-4天，研磨成粉状，即得。

进一步地，S4中，真空冷冻干燥工艺参数为：冻结温度-80℃，冷凝温度-51℃，真空度1.90Pa。

根据本发明的另一个目的，本发明提供如下技术方案：

一种铁皮石斛粗多糖含量检测方法，包括如下步骤：

S1，供试品溶液制备

准确称取上述制得的铁皮石斛多糖粉末0.2000g于50ml烧杯中并加入20.0ml超纯水，磁力搅拌器搅拌溶解40min使多糖全部溶解，所得多糖原液于4℃保存，吸取多糖原液稀释53倍即得供试品溶液；