[发明专利]检测NUMB内吞适配蛋白表达水平的试剂的应用和试剂盒

说明书

本发明属于生物技术领域，涉及检测NUMB表达水平的试剂的应用和试剂盒。更具体地，涉及检测NUMB表达水平的试剂在制备用于乳腺癌辅助诊断和/或乳腺癌患者预后判断的制剂中的应用以及一种用于乳腺癌辅助诊断和/或乳腺癌患者预后判断的试剂盒。临床样本检测结果显示，乳腺癌中NUMB表达较癌旁组织显著降低；且NUMB低表达不利于乳腺癌患者总体生存。因此，检测该基因表达变化的试剂可用于乳腺癌预后或者诊断、治疗。

技术领域

本发明属于生物技术领域，更具体地，涉及检测NUMB内吞适配蛋白(NUMB)表达水平的试剂在制备用于乳腺癌辅助诊断和/或乳腺癌患者预后判断的制剂中的应用以及一种用于乳腺癌辅助诊断和/或乳腺癌患者预后判断的试剂盒。

背景技术

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤，根据2012流行病学统计，全球每年新诊断多达170万乳腺癌患者，大约522000人死于乳腺癌，在发达国家成为仅次于肺癌的重要死亡因素。乳腺癌占所有女性肿瘤的25％，所有肿瘤相关死亡的15％。在中国，2013年新发乳腺癌病例278800人，按中国人群标准发病率为42.02/100000人，估计死亡人数为64600人，死亡率为9.74/100000人。在我国随着社会经济因素的改变，乳腺癌发病率和死亡率都在不断增加。随着对乳腺癌发生发展的生物学机制的理解，肿瘤靶向治疗和内分泌治疗等在乳腺癌治疗中起到了重要作用。随着分子分型和精准医学的发展，探索和发现新的乳腺癌关键靶基因，对于乳腺癌个体化诊断和治疗具有重要意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种新的乳腺癌预后标志物NUMB内吞适配蛋白(NUMB)，由此进一步提供检测NUMB表达水平的试剂在制备用于乳腺癌辅助诊断和/或乳腺癌患者预后判断的制剂中的应用以及一种用于乳腺癌辅助诊断和/或乳腺癌患者预后判断的试剂盒。

NUMB是一种蛋白编码基因，定位于14q24.2-q24.3，包含14个外显子，Gene ID:8650，其编码蛋白质定位于细胞膜、细胞核和细胞质。目前，有关NUMB基因在乳腺癌发生发展中的作用未见报道。本发明的发明人通过癌症和肿瘤基因图谱(Cancer Genome Atlas，TCGA)高通量数据挖掘发现NUMB低表达不利于乳腺癌患者预后，并通过收集临床乳腺癌患者样本和随访信息，进一步验证NUMB表达差异对乳腺癌患者的预后作用。

为了实现上述目的，本发明的第一方面提供检测NUMB内吞适配蛋白(NUMB)表达水平的试剂在制备用于乳腺癌辅助诊断和/或乳腺癌患者预后判断的制剂中的应用。

进一步地，所述检测NUMB表达水平包括检测NUMB的基因表达水平和/或检测NUMB的蛋白表达水平。

更具体地，所述检测NUMB表达水平的方法包括：通过RT-qPCR方法检测乳腺癌和癌旁组织中NUMB的表达量；通过分子探针技术检测乳腺癌和癌旁组织中NUMB mRNA表达量；通过免疫组化或Western-Blot检测乳腺癌和癌旁组织中NUMB蛋白表达量。

更具体地，所述检测NUMB表达水平的试剂为靶向NUMB编码DNA序列的寡核酸探针、PCR引物，或者为靶向NUMB的抗体。

根据本发明，优选地，所述检测NUMB表达水平的试剂为具有SEQ ID NO：1和SEQ IDNO：2所示核苷酸序列的实时荧光定量PCR特异性引物。

5’-AGGTTGAGCCATGCAGTAGG-3’，SEQ ID NO：1

5’-GCTTGTTCAGTGGCTGTTGT-3’，SEQ ID NO：2

本发明的第二方面提供一种用于乳腺癌辅助诊断和/或乳腺癌患者预后判断的试剂盒，该试剂盒包括：检测NUMB表达水平的试剂。

进一步地，所述检测NUMB表达水平的试剂为靶向NUMB编码DNA序列的寡核酸探针、PCR引物，或者为靶向NUMB的抗体。