[发明专利]一锅酶法制备DL-丝氨酸的方法有效
| 申请号： | 201910664186.3 | 申请日： | 2019-07-23 |
| 公开（公告）号： | CN110373440B | 公开（公告）日： | 2022-03-01 |
| 发明（设计）人： | 钱敏帆;杨卫华;张飞龙;葛文强;金力;华超;肖延铭 | 申请（专利权）人： | 长兴制药股份有限公司 |
| 主分类号： | C12P13/06 | 分类号： | C12P13/06 |
| 代理公司： | 浙江千克知识产权代理有限公司 33246 | 代理人： | 黎双华;李欣玮 |
| 地址： | 313100 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一锅 法制 dl 丝氨酸 方法 | ||
1.一锅酶法制备DL-丝氨酸的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
(1)以甲醛、甘氨酸为底物，在辅酶存在下，重组D-苏氨酸醛缩酶将一分子甲醛和一分子甘氨酸催化转化为D-丝氨酸；
(2)所述D-丝氨酸在重组丙氨酸消旋酶作用下转化为DL-丝氨酸；
所述的重组丙氨酸消旋酶由假单胞菌MYb115来源的丙氨酸消旋酶重组获得，所述假单胞菌MYb115来源的丙氨酸消旋酶基因为SEQ ID NO.2；
所述步骤(1)辅酶为磷酸吡哆醛；
所述步骤(1)进一步添加0.01mol/L～0.03mol/L的镁盐；所述镁盐选自氯化镁、硫酸镁、硝酸镁中的任意一种或多种组合；
所述步骤(2)反应温度为30℃～40℃，当转化甘氨酸浓度低于2g/L，将转化温度提高至45～50℃，继续反应3～5小时。
2.根据权利要求1所述的一锅酶法制备DL-丝氨酸的方法，其特征在于，所述的重组D-苏氨酸醛缩酶由节杆菌来源的D-苏氨酸醛缩酶、黄单胞菌来源的D-苏氨酸醛缩酶或无色杆菌来源的D-苏氨酸醛缩酶重组获得。
3.根据权利要求1所述的一锅酶法制备DL-丝氨酸的方法，其特征在于，所述步骤(1)催化转化的pH为6.0～9.0。
4.根据权利要求1所述的一锅酶法制备DL-丝氨酸的方法，其特征在于，所述步骤(1)催化转化温度为30℃～40℃，反应时间为10～60min。
5.根据权利要求1所述的一锅酶法制备DL-丝氨酸的方法，其特征在于，步骤(2)之后还包括后处理步骤，所述后处理步骤包括对步骤(2)得到的DL-丝氨酸转化液经微滤膜、纳滤膜以及精密过滤器过滤浓缩，离心，洗涤，获得DL-丝氨酸晶体。
6.根据权利要求5所述的一锅酶法制备DL-丝氨酸的方法，其特征在于，所述浓缩时温度控制在45～50℃。
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