[发明专利]杨树PsnERF1基因cDNA及其编码的多肽在审

专利信息
申请号: 201910667210.9 申请日: 2019-07-23
公开(公告)号: CN110295176A 公开(公告)日: 2019-10-01
发明(设计)人: 姜廷波;姚文静;周博如;赵凯 申请(专利权)人: 东北林业大学
主分类号: C12N15/29 分类号: C12N15/29;C07K14/415;A01H5/00
代理公司: 哈尔滨市松花江专利商标事务所 23109 代理人: 岳泉清
地址: 150040 黑龙*** 国省代码: 黑龙江;23
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摘要:
搜索关键词: 杨树 多肽 基因 氨基酸序列 耐盐能力 木本植物 核苷酸序列 转基因杨树 过量表达 基因cDNA 基因编码 胁迫条件 转基因 氨基酸 克隆 转入
【说明书】:

杨树PsnERF1基因的cDNA及其编码的多肽,它涉及杨树PsnERF1基因的cDNA及其编码的多肽。杨树PsnERF1基因的cDNA,具体的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。杨树PsnERF1基因的cDNA序列编码的多肽,其氨基酸序列包括445个氨基酸,杨树PsnERF1基因编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明提供了一个克隆木本植物杨树PsnERF1基因,将其转入到杨树中过量表达,可提高转基因杨树耐盐能力,转基因耐盐能力比对照提高10%以上,在胁迫条件下株高和鲜重明显比对照高。

技术领域

本发明涉及杨树PsnERF1基因的cDNA及其编码的多肽。

背景技术

自然环境中盐碱、干旱等严重影响植物的生长发育。全世界45%的农业用地受到不同程度干旱的影响,全球19.5%的灌溉农业用地属于盐碱化土地,预计到2028年将有30%的土地盐碱化,2050年将有超过50%的土地受到盐碱化的影响。中国土地干旱和土壤盐碱化日益严重,中国的盐碱地面积达到全世界盐碱地面积10%,培育抗旱抗盐植物新品种是充分利用盐碱地和改善土壤盐碱化的重要途径。

发明内容

本发明目的是为了解决杨树耐盐能力低的问题,而提供杨树PsnERF1基因的cDNA及其编码的多肽。

本发明杨树PsnERF1基因的cDNA,包含5’端非翻译区(1-199)、蛋白质编码区(200-1537)和3’端非翻译区(1538-1584),具体的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。

本发明杨树PsnERF1基因的cDNA序列编码的多肽,其氨基酸序列包括445个氨基酸,杨树PsnERF1基因编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。

本发明提供了一个克隆木本植物杨树PsnERF1基因,将其转入到杨树中过量表达,可提高转基因杨树耐盐能力,转基因耐盐能力比对照提高10%以上,在胁迫条件下株高和鲜重明显比对照高。

附图说明

图1为本发明中利用PCR对转基因杨树进行DNA水平检测的电泳图,其中M:DL2000;P:阳性质粒;W:野生型杨树;T1-T8:转基因杨树;

图2为本发明中利用RT-PCR对转基因杨树进行RNA水平检测的电泳图,其中M:DL2000;P:阳性质粒;W:野生型杨树;T1-T8:转基因杨树。

具体实施方式

本发明技术方案不局限于以下所列举具体实施方式,还包括各具体实施方式间的任意组合。

具体实施方式一:本实施方式杨树PsnERF1基因的cDNA,包含5’端非翻译区 (1-199)、蛋白质编码区(200-1537)和3’端非翻译区(1538-1584),具体的核苷酸序列如SEQ IDNO:1所示。

具体实施方式二:本实施方式杨树PsnERF1基因的cDNA序列编码的多肽,其氨基酸序列包括445个氨基酸,杨树PsnERF1基因编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。

杨树PsnERF1基因是按照以下方法得到的:

①利用RNA提取试剂盒提取小黑杨(P.simonii×P.nigra)的总RNA,利用RNA PCRKit(AMV)Ver.3.0试剂盒将之反转录成cDNA;

②根据杨树基因组序列设计引物,

引物F1:5’-ATGATGCAGAAAGATTTTAGCACTG-3’;

引物R1:5’-TTAACCAGTGGAGGAAGGACGGCG-3’;

以杨树cDNA为模版,用PCR获得全长杨树PsnERF1基因cDNA序列;

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