[发明专利]用于鹿流行性出血热病毒检测的试剂、检测方法及应用有效
| 申请号： | 201910667580.2 | 申请日： | 2019-07-23 |
| 公开（公告）号： | CN110257561B | 公开（公告）日： | 2023-09-05 |
| 发明（设计）人： | 林彦星;花群俊;黄超华;史卫军;曹琛福;张彩虹;杨俊兴;花群义 | 申请（专利权）人： | 深圳海关动植物检验检疫技术中心;武定县动物疫病预防控制中心 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11 |
| 代理公司： | 深圳鼎合诚知识产权代理有限公司 44281 | 代理人： | 李小焦;彭家恩 |
| 地址： | 518000 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 流行性出血热 病毒 检测 试剂 方法 应用 | ||
1.一种用于鹿流行性出血热病毒检测的试剂，其特征在于：所述试剂包括用于一步法逆转录重组酶聚合酶扩增的鹿流行性出血热病毒特异性引物对和探针，所述探针在引物对的扩增靶标区域内，所述引物对的上游引物为Seq ID No.1所示序列，下游引物为Seq IDNo.2所示序列，所述探针为Seq ID No.3所示序列；
Seq ID No.1：5’-ATAAGAGGGACTGGTATTTGGGAAAATGATGAAT-3’
Seq ID No.2：5’-CCAAAGCAGACGAAGCAAAATAGTCTGAACATGAT-3’
Seq ID No.3：
5’-CAGGAGGGAATCTATCTGCTAGCGAGAGTGCTACTACGCTGGGAACTATC -3’
其中，SEQ ID No.3所示的探针序列中，第32个碱基修饰荧光淬灭基团-dT，第33个碱基替换为碱基类似物dSpacer，第35个碱基修饰荧光基团-dT，3’末端修饰C3 Spacer。
2.根据权利要求1所述的用于鹿流行性出血热病毒检测的试剂，其特征在于：所述荧光淬灭基团-dT为BHQ1-dT。
3.根据权利要求1所述的用于鹿流行性出血热病毒检测的试剂，其特征在于：所述荧光基团-dT为6-FAM-dT。
4.根据权利要求1-3任一项所述的用于鹿流行性出血热病毒检测的试剂在鹿流行性出血热病毒非诊断治疗目的的检测中的应用。
5.根据权利要求1-3任一项所述的用于鹿流行性出血热病毒检测的试剂在制备鹿流行性出血热病毒检测试剂盒、检测试纸条或检测芯片中的应用。
6.一种用于鹿流行性出血热病毒检测的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒中含有权利要求1-3任一项所述的用于鹿流行性出血热病毒检测的试剂。
7.根据权利要求6所述的用于鹿流行性出血热病毒检测的试剂盒，其特征在于：还包括用于一步法逆转录重组酶聚合酶扩增的反应液、酶和反应添加剂。
8.一种鹿流行性出血热病毒的非诊断治疗目的的检测方法，其特征在于：包括采用权利要求1-3任一项所述的用于鹿流行性出血热病毒检测的试剂，或权利要求6或7所述的试剂盒，对待测样品的核酸进行一步法逆转录重组酶聚合酶扩增检测，并采用荧光检测仪收集荧光。
9.根据权利要求8所述的检测方法，其特征在于：所述一步法逆转录重组酶聚合酶扩增的反应条件为，40℃恒温反应15分钟。
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