[发明专利]一株枯草芽孢杆菌及其培养方法与应用有效

申请号：	201910669848.6	申请日：	2019-07-24
公开（公告）号：	CN110331109B	公开（公告）日：	2020-11-03
发明（设计）人：	付龙云;李彦;王艳芹;赵自超;袁长波;井永苹;薄录吉	申请（专利权）人：	山东省农业科学院农业资源与环境研究所
主分类号：	C12N1/20	分类号：	C12N1/20;D21C5/00;C12R1/125
代理公司：	济南竹森知识产权代理事务所(普通合伙) 37270	代理人：	朱家富
地址：	250100 山东***	国省代码：	山东;37
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摘要：
搜索关键词：	枯草芽孢杆菌及其培养方法应用
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【权利要求书】：

1.一株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ASD05，于2019年5月15日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号CGMCC No.17807。

2.权利要求1所述枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ASD05的培养方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)取活化后的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ASD05，接种于种子培养基，在35～38℃、200～240rpm摇床培养22～25h，制得液体种子；

(2)取步骤(1)制得的液体种子，按体积百分比0.5％的比例接种于扩大培养基，在35～38℃、200～240rpm摇床培养34～38h，制得菌液。

3.如权利要求2所述枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ASD05的培养方法，其特征在于，所述步骤(1)中活化后的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ASD05为将枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ASD05接种至活化培养基，在35～38℃活化培养22～25h；活化培养基为LB固体培养基。

4.如权利要求2所述枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ASD05的培养方法，其特征在于，所述步骤(1)中种子培养基组分如下：

蛋白胨10g/L；酵母粉5g/L；Nacl 10g/L；葡萄糖5g/L；余量水。

5.如权利要求2所述枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ASD05的培养方法，其特征在于，所述步骤(2)中扩大培养基组分如下：

蛋白胨10g/L；酵母粉5g/L；Nacl 10g/L；土豆100g/L；葡萄糖5g/L；余量水。

6.权利要求1所述枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ASD05在增加秸秆改性材料比表面积和/或孔容中的应用。

7.如权利要求6所述应用，其特征在于，步骤如下：

(a)取权利要求2所述菌液，按体积百分比0.5％的比例接种于诱导发酵培养基，在35～38℃、200～240rpm摇床培养36～38h，制得菌体发酵液；

(b)取干燥、粉碎的玉米秸秆，按照玉米秸秆：无菌水：菌体发酵液＝100：(10～50)：(0.3～0.8) 的重量比混合均匀，在35～45℃孵育36～60h，制得预处理玉米秸秆；

(c)将步骤(b)制得的预处理玉米秸秆在70～105℃条件下烘干24～48h，制得多孔改性秸秆材料。

8.如权利要求7所述应用，其特征在于，所述步骤(a)中，诱导发酵培养基组分如下：

蛋白胨10g/L，酵母粉5g/L，NaCl 10g/L，土豆100g/L，木聚糖5g/L，果胶5g/L，余量水。

9.如权利要求7所述应用，其特征在于，所述步骤(b)中菌体发酵液的活菌密度为5.0×10⁹～1.0×10¹⁰CFU/mL。