[发明专利]一种防治牦牛胃肠道疾病的生物制剂及制备方法

权利要求书

1.一种防治牦牛胃肠道疾病的生物制剂，其特征在于：所述生物制剂中，按活菌量，纳豆菌：保加利亚杆菌：酪酸梭菌：多对毛螺菌：不解糖优杆菌＝1:2～5:5～10:3～5:3～5。

2.根据权利要求1所述的一种防治牦牛胃肠道疾病的生物制剂，其特征在于：所述生物制剂中，活菌总量≥6×10⁸CFU/ml。

3.根据权利要求1所述的一种防治牦牛胃肠道疾病的生物制剂，其特征在于：所述生物制剂为冻干粉。

4.权利要求1～3任意一项所述一种防治牦牛胃肠道疾病的生物制剂的制备方法，其特征在于：所述制备方法包括如下步骤：

(1)分别培养纳豆菌、保加利亚杆菌、酪酸梭菌、多对毛螺菌和不解糖优杆菌，培养至各培养基中活菌量≥6×10⁸CFU/ml；

(2)随后将各培养基离心获得各菌体沉淀，再按照活菌量比为：纳豆菌：保加利亚杆菌：酪酸梭菌：多对毛螺菌：不解糖优杆菌＝1:2～5:5～10:3～5:3～5，将各组菌体沉淀混匀，获得混合菌体沉淀；

(3)将所述混合菌体沉淀与微生物冻干保护剂按质量比为1:5～10混匀，在25℃水浴平衡30～60min，再通过液氮速冻15～30s进行快速冷冻，随后在-45～-65℃下冻干18～24h，即得所述生物制剂。

5.根据权利要求4所述的一种防治牦牛胃肠道疾病的生物制剂的制备方法，其特征在于：所述微生物冻干保护剂的制备方法包括如下步骤：

(1)将酪酸梭菌扩大培养，获得发酵液；

(2)将所述发酵液稀释到原体积的2～10倍，调节pH至6 .5～7 .5，获得发酵稀释液；所述发酵稀释液中，酪酸梭菌活菌量≥6×10⁸CFU/ml；

(3)以发酵稀释液计，在每100ml发酵稀释液中增加6～15g脱脂乳粉、0 .5～2gVC、1～3g水苏糖、3～5g低聚乳果糖、3～5g异麦芽酮糖、1～3g壳寡糖；混匀即得所述微生物冻干保护剂。

6.根据权利要求5所述的一种防治牦牛胃肠道疾病的生物制剂的制备方法，其特征在于：步骤(1)所述扩大培养酪酸梭菌的培养基为专用培养基，按质量分数，所述专用培养基包括：1％牛肉膏、2％酵母粉、2％玉米粉、1％蛋白胨，和余量的无菌水。

7.根据权利要求4所述的一种防治牦牛胃肠道疾病的生物制剂的制备方法，其特征在于：步骤(1)所述对纳豆菌、保加利亚杆菌、酪酸梭菌、多对毛螺菌和不解糖优杆菌的培养，分别使用生物制剂制备装置进行，培养方法包括如下步骤：

(1)将培养盘(10)顺次经冲洗室(11)、蒸洗室(12)、烘干室(13)、灭菌室(14)清洗、灭菌后，通过培养基灌注机构(31)灌注培养基；再通过微生物接种机构(32)接种所需微生物；

(2)将所述培养盘(10)置于培养室(16)内培养至所需活菌量；

(3)培养结束后，将所述培养盘(10)的内容物从第一投料口(171)倒入混合仓(17)内，即完成培养。