[发明专利]一种提高丝状真菌木质纤维素降解及蛋白生产的方法在审
申请号: | 201910671573.X | 申请日: | 2019-07-24 |
公开(公告)号: | CN112300949A | 公开(公告)日: | 2021-02-02 |
发明(设计)人: | 田朝光;林良才;王珊珊 | 申请(专利权)人: | 中国科学院天津工业生物技术研究所 |
主分类号: | C12N1/15 | 分类号: | C12N1/15;C12N9/12;C12N9/42;C12P19/14;C12P21/00;C12R1/645;C12R1/66;C12R1/885;C12R1/80 |
代理公司: | 北京商专永信知识产权代理事务所(普通合伙) 11400 | 代理人: | 欧阳石文 |
地址: | 300308 天津*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 提高 丝状 真菌 木质 纤维素 降解 蛋白 生产 方法 | ||
1.一种提高丝状真菌纤维素酶和/或半纤维酶和/或其它蛋白的表达、和/或提高丝状真菌的纤维素降解利用的方法,包括步骤:
抑制丝状真菌的纤维素降解相关丝氨酸/苏氨酸激酶或其基因的表达和/或活性,从而提高丝状真菌纤维素酶和/或半纤维酶和/或其它蛋白的表达、和/或提高丝状真菌的纤维素降解利用能力。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的丝状真菌包括:脉孢菌(Neurospora)、曲霉(Aspergillus)、木霉(Trichoderma)、青霉(Penicillium)、毁丝霉(Myceliophthora)或侧孢霉(Sporotrichum)。
3.如权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述抑制包括敲除和/或下调所述的纤维素降解相关丝氨酸/苏氨酸激酶的表达和/或活性。
4.如权利要求1-3任一所述的方法,所述纤维素降解相关丝氨酸/苏氨酸激酶选自下组:
(a)SEQ ID NO.:1、3或5所示序列的一种或多种;或
(b)与SEQ ID NO.:1、3或5所示序列同源性为50%以上,较佳地为60%以上,更佳地为65%以上的纤维素降解相关丝氨酸/苏氨酸激酶。
5.一种纤维素降解相关丝氨酸/苏氨酸激酶或其基因的抑制剂的用途,其特征在于,(a)用于提高丝状真菌纤维素和/或半纤维酶和/或其它蛋白的表达;和/或(b)用于提高丝状真菌的纤维素降解利用能力。
6.如权利要求5所述的用途,其特征在于,所述的抑制剂包括所述纤维素降解相关激酶的抗体、抑制性mRNA、反义RNA、microRNA(miRNA)、siRNA、shRNA以及激酶的活性抑制剂。
7.一种用于降解纤维素的工程菌,其特征在于,所述工程菌中纤维素降解相关丝氨酸/苏氨酸激酶被敲除或被下调。
8.如权利要求7所述的工程菌,其特征在于,所述工程菌改造自野生菌脉孢菌(Neurospora)、曲霉(Aspergillus)、木霉(Trichoderma)、青霉(Penicillium)、毁丝霉(Myceliophthora)或侧孢霉(Sporotrichum)。
9.一种生产纤维素酶和/或半纤维素酶和/或其它蛋白的方法,其特征在于,在纤维素原料和/或木质纤维素水解糖的存在下,培养权利要求7或8所述的工程菌,并从培养物中分离提纯所述的纤维素酶和/或半纤维素酶和/或其它蛋白。
10.一种降解木质纤维素并获得纤维素降解产物的方法,其特征在于,在木质纤维素原料的存在下,培养权利要求7或8所述的工程菌,从而降解木质纤维素素并获得木质纤维素素降解产物。
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