[发明专利]一种精氨酸异构体的检测方法有效
申请号: | 201910671653.5 | 申请日: | 2019-07-24 |
公开(公告)号: | CN110441415B | 公开(公告)日: | 2022-04-19 |
发明(设计)人: | 刘超;李斌水;李晓微;汪飞;石江涛;梁云科;刘翠环;李素霞;李海松;张亮;武存景 | 申请(专利权)人: | 精晶药业股份有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/74 |
代理公司: | 石家庄国为知识产权事务所 13120 | 代理人: | 郝晓红 |
地址: | 055550*** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 精氨酸 异构体 检测 方法 | ||
1.一种精氨酸异构体的检测方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)取D-精氨酸对照品制备对照品水溶液,将对照品水溶液与衍生试剂配制成对照品溶液;
(2)取待测品制备待测品水溶液,将待测品水溶液与衍生试剂配制成待测品溶液;
(3)分别取所述对照品溶液及待测品溶液,用液相色谱法进行检测,采用外标法计算待测品中D-精氨酸的含量;
所述液相色谱的色谱条件为:波长225-235nm;色谱柱:十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱;柱温为25-35℃;流动相:流动相A为0.05mol/L乙酸铵溶液-乙腈,流动相B为乙腈;进样温度为2-8℃,进行线性梯度洗脱,所述线性洗脱梯度如下:0min:100%A+0%B;20min:100%A+0%B;35min:80%A+20%B;37min:80%A+20%B;37.1min:100%A+0%B;45min:100%A+0%B;
所述流动相A中0.05mol/L乙酸铵溶液与乙腈体积比为85-95:5-15;
所述衍生试剂由摩尔比为1-1.05:1的邻苯二醛和N-乙酰-L-半胱氨酸的混合物与硼酸缓冲液配制而成。
2.如权利要求1所述的精氨酸异构体的检测方法,其特征在于:所述对照品溶液中D-精氨酸与N-乙酰-L-半胱氨酸摩尔比为0.001:1-1.5;所述待测品溶液中精氨酸与N-乙酰-L-半胱氨酸摩尔比为1:1-1.5。
3.如权利要求1所述的精氨酸异构体的检测方法,其特征在于:所述梯度检测的检测波长为230nm。
4.如权利要求1所述的精氨酸异构体的检测方法,其特征在于:检测过程中进样体积为10-20μl,流速为0.5-2ml/min。
5.如权利要求1所述的精氨酸异构体的检测方法,其特征在于:所述硼酸缓冲液为硼酸-氢氧化钠缓冲液,pH为8-10。
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