[发明专利]一种检测单核增生李斯特菌的试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种用于检测单核增生李斯特菌的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括包装盒和容纳于其中的试纸条，所述试纸条包括底板和依次搭接粘贴在所述底板上的样品垫、标记物垫、反应垫、和吸水垫,所述标记物垫上包被有用彩色乳胶颗粒标记的抗体,所述反应垫上设置有质控区和测试区，所述质控区包被有生物素，所述测试区包被有单核增生李斯特菌体蛋白抗体。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述用彩色乳胶颗粒标记的抗体包括用蓝色乳胶颗粒标记的抗生物素抗体和用红色乳胶颗粒标记的抗单核增生李斯特菌菌体蛋白抗体。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述彩色乳胶颗粒为直径为200-500nm或其间任意值的彩色聚苯乙烯乳胶颗粒。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述彩色乳胶颗粒为直径为200、250、300、350、400、450或500nm的彩色聚苯乙烯乳胶颗粒。

5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述底板由聚氯乙烯制成。

6.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述样品垫由玻璃纤维制成。

7.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述标记物垫由聚酯膜制成。

8.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述反应垫由硝酸纤维素膜制成。

9.一种制备根据权利要求1至8中任一项所述的试剂盒的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

步骤1）：用彩色乳胶颗粒标记抗体：用0.01-0.5M PH6-8的PBS将所述彩色乳胶颗粒稀释成0.5-5%的终浓度，加入所述抗体使其终浓度为0.1-0.5mg/ml；0-4℃反应过夜；加入终浓度为0.5-5%的BSA封闭0.5-4h；离心，去上清，将沉淀用含0.1-1%BSA的0.01-0.5M PH6-8的PBS复溶，得到乳胶-抗体结合物，置于0-4℃备用；

步骤2）：点膜：用0.01-0.5M PH6-8的PBS稀释所述抗体，用点膜机将所得稀释液点在硝酸纤维素膜上的测试区或质控区，25-45℃烘干1-4小时，得到点好的膜，密封置于室温备用；

步骤3）：点乳胶：用含0.1-0.5%BSA的0.01-0.1M PH6-8的PBS稀释步骤1）中标记好的所述乳胶-抗体结合物，用机器喷点在聚酯膜上，25-45℃烘干1-4小时，得到点好的乳胶，密封置于室温备用；

步骤4）：组装：将所述点好的膜、吸水垫、所述点好的乳胶和玻璃纤维分别按顺序粘贴在PVC底板上，切成相应宽度并包装待用。