[发明专利]抑制性T细胞及筛选方法和抑制自身免疫反应中的应用

说明书

本发明涉及一种CD8⁺CXCR3⁺IL‑10⁺T细胞及筛选方法和抑制自身免疫反应中的应用。其细胞表面具有表达CD8、CXCR3抗原的亚群，这种亚群具有细胞因子IL‑10的表达来抑制活化的T细胞，通过Fas、FasL、PD‑1、PDL1分子接触杀死活化的T细胞,从而抑制免疫反应。通过筛选含有CD8⁺CXCR3⁺IL‑10⁺T细胞种群的样品，以便检测不同生物标志物的细胞表达水平，所述生物标志物包括CD8、CXCR3、CD62L、CD44和CCR7。其在制备用于抑制T细胞增殖和细胞因子生成的药物组合物中的应用，所述抑制T细胞增殖和细胞因子生成是通过将所述CD8⁺CXCR3⁺IL‑10⁺T细胞与所述活化反应性T细胞相接触来实现的。

技术领域

本发明涉及调节性CD8⁺CXCR3⁺IL-10⁺T 细胞和长期、培养扩增、活化以及在免疫治疗和抑制免疫反应(包括移植、自身免疫性疾病、癌症治疗等) 中使用该细胞的方法。

背景技术

维持免疫平衡是至关重要的。免疫系统，对抗入侵人体的病原微生物，也可以破坏宿主的有机体，即自身免疫性疾病和过敏反应。因此，免疫反应必须受到包括专业调控细胞在内的多种机制的严格调控。这种专业的调控细胞T细胞被认为是免疫系统的“控制塔”。毫无疑问，近十年来T细胞研究的一个非凡进展是由自然产生CD4⁺CD25⁺T细胞的发现所引领的(Sakaguchi, S等人，J. Immunol. 1995. 155: 1151–1164；Sakaguchi, S等人，Annu.Rev. Immunol. 2004. 22:531–562；Shevach等人，Annu. Rev. Immunol. 2000. 18:423–449；Sakaguchi, S等人 Cell.2000. 101: 455–458)。

CD8⁺CD122⁺ T细胞在维持小鼠免疫稳态中具有重要的作用。因为CD8和CD122的表达模式人类与小鼠不同，与小鼠CD8⁺CD122⁺T细胞相对应的人类CD8⁺T细胞，尚未被鉴定。在这专利中，我们通过DNA芯片分析比较CD8⁺CD122⁺细胞和CD8⁺CD122^-细胞在小鼠体内的基因表达谱，发现CXCR3在CD8⁺CD122⁺细胞中优先表达。当我们分析小鼠CD8⁺细胞中CD122和CXCR3的表达时，我们观察到一定数量CD122⁺CXCR3⁺细胞。小鼠CD8⁺CXCR3⁺细胞与CD8⁺CD122⁺细胞在体内和体外的调节活性相似。小鼠存在CD8⁺CD122⁺CXCR3⁺细胞，人体内存在CD8⁺CXCR3⁺细胞，但不存在CD8⁺CD122⁺细胞。在体外实验中，在体外实验中，人CD8⁺CXCR3⁺细胞表现出明显的免疫抑制作用，对CD8⁺CXCR3^-细胞产生IL-10和抑制IFN-γ产生的调节活性。这些结果提示人类CD8⁺CXCR3⁺ T细胞和小鼠CD8⁺CD122⁺T细胞是相应的。