[发明专利]一种靶向识别免疫细胞的多肽及其应用

说明书

本发明公开了一种识别免疫细胞的多肽，该多肽包括如下氨基酸序列：(a)含人类Triokinase/FMN环化酶的C末端片段序列AILEVLQS的氨基酸序列及其同源序列；或，(b)与(a)中所述的氨基酸序列基本相同的氨基酸序列，所述基本相同是指与上述(a)中所述的氨基酸序列具有70％以上的序列同一性。本发明还公开了编码所述多肽的核酸序列；一种靶向识别免疫细胞的，包括如上所述的多肽以及带有报告基团的多肽探针；包括上述探针的试剂盒；以及，如上所述的多肽或探针的相关应用。

技术领域

本发明属于分子生物学和细胞检测及成像领域。具体地，本发明涉及一种能够靶向识别免疫细胞的多肽及其包含该多肽的探针、试剂盒，及其进行免疫标记的方法。

背景技术

免疫细胞是介导身体免疫应答的细胞，包括多种不同类型的细胞。这些细胞通过血液和淋巴系统循环，并被募集到组织损伤和感染的位点。不同类型的免疫细胞通过其功能和物理特征而区分开，但免疫细胞大都来自于造血干细胞中的同一起源，并响应于内部和外界的信号按照不同的方式发育。经典的免疫学观点认为，单核吞噬系统是骨髓来源的髓样细胞群体，其中单核细胞在血液、骨髓和脾脏中循环且不进行稳态增殖，其离开血液进入组织后衍生分化为巨噬细胞。而巨噬细胞是在淋巴和非淋巴组织中的固有吞噬细胞，被认为经由清除凋亡细胞和产生生长因子来参与稳态组织的体内平衡。而且，这些细胞在不同组织中，其表型、稳态周期和功能可显示出非常明显的异质性(Geissmann et al.,Development of monocytes,macrophages and dendritic cells,Science.2010Feb 5；327(5966):656-61)。该类细胞在组织正常发育、体内平衡、组织修复和对病原体的免疫反应中起着多种不同作用。成熟的单核/巨噬细胞在体内游动性较强。而在相关组织中，单核/巨噬细胞吞噬细菌、病原体和死细胞后，可以通过附近的淋巴管进入淋巴结或淋巴器官如脾脏等，将吞噬物的抗原提呈给其它淋巴细胞，如T细胞或B细胞等。

近年来发现，在多数成熟组织中的巨噬细胞起源于胚胎发育阶段而不是来自循环性的单核细胞。许多组织都具有由胚胎衍生型巨噬细胞和循环性单核细胞衍生的巨噬细胞(也称为循环性巨噬细胞、成年性巨噬细胞)，这两类不同来源的巨噬细胞组成了成熟组织中的巨噬细胞群。这种对组织中巨噬细胞的新理解促进了对循环性单核细胞功能的重新审视。炎症反应会激发单核细胞分化形成巨噬细胞，但在炎症反应过程中驻留性和新征募的巨噬细胞是否会实施同样的功能还不清楚(Slava Epelman,Kory J.Lavine,andGwendalyn J.Randolph，Origin and Functions of Tissue Macrophages，Immunity 41,July 17,2014，21-35)。由此，也造成了巨噬细胞在不同解剖部位，甚至同一解剖部位，由于来源不同、组织微环境下环境信号对其的刺激不同，可以造成巨噬细胞被激活形成不同的亚群，表达不同的表面标记物。所以，通过单一的生物标记物抗体识别来辨别不同的巨噬细胞亚群就变得很困难或得到相互矛盾的结果。例如在昆明小鼠实验中，腹腔巨噬细胞的识别用F4/80抗体，肺泡巨噬细胞用CD11c抗体，腹壁肌巨噬细胞用CD68抗体，才能获得比较好的结果。

另一方面，由于巨噬细胞具有分布广、多功能等特点，在体内对单核/巨噬细胞的大范围识别和成像，例如腹腔、呼吸道、肠道、整个器官、肌肉组织等的分子成像，可以对生物体内免疫系统的变化和发展，炎症或肿瘤发生发展提供直观而又灵敏的细胞和分子层面的变化信息，这对精准诊断疾病无疑是非常重要的。而要达到这一目的，需要一种广谱性单核/巨噬细胞识别探针来实现。