[发明专利]一种修复石油烃污染土壤及地下水的功能菌群的制备方法

说明书

本发明公开了一种修复石油烃污染土壤及地下水的功能菌群的制备方法，包括：以待修复石油烃污染土壤或地下水的土著微生物作为菌源；将菌源接种到含有石油烃的培养液中进行菌群诱导驯化，构建原场地污染条件下的功能菌群；将功能菌群接种到含有石油烃的发酵罐中进行混合发酵；收集发酵液中的菌体，并制备菌粉，得到用于修复石油烃污染土壤及地下水的功能菌群。本发明的功能菌群对石油烃污染土壤及地下水具有广泛适用性，功能菌群的构建基于原污染环境土著微生物，菌群组成随污染环境动态变化，对于无法人工分离培养的污染物降解菌种能够有效富集培养，对所修复的目标环境适应性和针对性强，投加后可快速起效且稳定持久，无需长期持续投加。

技术领域

本发明涉及生化环保技术领域，具体涉及一种修复石油烃污染土壤及地下水的功能菌群的制备方法。

背景技术

随着原油开采、石油炼化行业的迅速发展，各类工业含石油烃废弃物的产生也相应增多，含油废水、落地原油排入环境，对土壤及地下水造成严重污染，石油烃污染土壤及地下水的修复工作刻不容缓。

目前，石油烃污染土壤及地下水的修复方法主要有热脱附、化学氧化、淋洗和生化处理等，传统的物理、化学方法处理成本较高，易产生二次污染，对某些中间产物降解不彻底；相比之下，生物修复技术具有操作简单、绿色、安全、费用较低、长效性较好等优点，是最符合自然规律的一类技术，在石油烃污染土壤及地下水修复领域具有良好的发展前景。

生物强化是土壤及地下水生物修复领域中的一类重要技术，通过向土壤和地下水中投加从自然界中筛选的优势菌种或通过基因组合技术产生的高效菌种，以去除某一种或某一类有害物质。目前为止，国内外研究热点在于寻找或构建高效降解菌种，通过单一菌种或其相互间的复配制备生物菌剂，用于环境修复。国内外已有较为成熟的生物菌剂产品投入市场，但类似产品均为外源菌种，且菌种组成较为单一，对特定的土壤及地下水环境适应性和针对性较差，在待修复场地中难以成为优势菌种，需长期持续投加，加之高效菌种的分离、构建难度大，研发周期长，因此菌剂产品大多价格昂贵，运行成本高昂，并且外源菌种的投加还有可能因与土著菌种生态位重叠而造成生物安全性问题。同时，市售石油烃降解菌剂以降解直链烷烃的菌种居多，对石油烃中的芳香烃降解能力有限。另外，依靠目前生物技术仅能分离自然界1％左右的菌种，多数菌种无法分离，因此生态环境中土著微生物对污染物降解的巨大潜力尚未充分发掘。

从已有的研究成果来看，以待修复污染土壤及地下水土著微生物为菌种来源，制备具有针对性的石油烃降解功能菌群，用于原石油烃污染场地环境修复的技术方法和工程实例尚不多见。

发明内容

针对上述问题中存在的不足之处，本发明提供一种修复石油烃污染土壤及地下水的功能菌群的制备方法。

本发明公开了一种修复石油烃污染土壤及地下水的功能菌群的制备方法，包括：

菌源采样：以待修复石油烃污染土壤或地下水的土著微生物作为菌源；

功能菌群构建：将所述菌源接种到含有石油烃的培养液中进行菌群诱导驯化，构建原场地污染条件下的功能菌群；

混合发酵：将所述功能菌群接种到含有石油烃的发酵罐中进行混合发酵；

发酵后处理：收集发酵液中的菌体，并制备菌粉，得到用于修复石油烃污染土壤及地下水的功能菌群。

作为本发明的进一步改进，所述功能菌群构建，包括：

配制培养液：所述培养液的配方为：基础无机盐培养基、待修复石油烃污染土壤的渗滤液或待修复石油烃污染地下水、无机载体、表面活性剂、自来水；将以上成分在布有曝气设施的培养容器中混合均匀；

接种：在所述培养液中添加原油、诱导底物并混合均匀，将所述菌源接入培养容器中；

菌群诱导驯化：对接种后的培养液进行曝气培养，得到含诱导驯化完成的培养液；