[发明专利]制备用于细胞分选的链霉亲和素偶联微泡冻干制剂的方法

权利要求书

1.制备用于细胞分选的链霉亲和素偶联微泡的冻干制剂的方法，包括如下步骤：

(i)在室温下在烧瓶中使磷脂和脂肪酸用有机溶剂溶解，接着在旋转蒸发仪上于50～80℃蒸除溶剂，然后于30～40℃真空干燥；

(ii)向烧瓶中加水，超声波振荡使形成混悬液；

(iii)取所得混悬液，加入聚乙二醇，混匀，加入链霉亲和素，室温孵育20～45分钟；

(iv)将上一步骤所得混悬液分装到玻璃瓶中，使密封用的胶塞将玻璃瓶半加塞，在真空冷冻干燥机内进行抽真空、冷冻、升华、干燥以除去水分，压塞密封，得到冻干粉末；

(v)通过针头穿刺胶塞向密塞玻璃瓶内充入包埋气体，使玻璃瓶内的空间气氛充满包埋气体，即得到冻干制剂。

2.根据权利要求1的方法，其中在每一个玻璃瓶空间内，充入的包埋气体重量与磷脂重量比为50～500：1，例如为100～250：1，例如为100～200：1。

3.根据权利要求1的方法，其中聚乙二醇是以5～20％水溶液形式添加。

4.根据权利要求1的方法，其中包埋气体是以该气体的液化气形式添加的。

5.根据权利要求1的方法，其中步骤(i)中，所述有机溶剂选自丙酮、己烷、乙醇及其组合。

6.根据权利要求1的方法，所制得的冻干制剂包括用胶塞密封的玻璃瓶，玻璃瓶内分装有能够在遇到水性载体液时形成微泡的冻干粉末，并且玻璃瓶内的空间气氛为选自下列的用于包裹到所述微泡中的包埋气体：C3F8、SF6、CF4、氟利昂、N2、CO2、O2、空气(尤其是选自：C3F8、SF6、CF4)；所述微泡与链霉亲和素偶联并且由选自下列的材料构成：分子量2000～6000的聚乙二醇、磷脂、脂肪酸。

7.根据权利要求1的方法，所制得的冻干制剂用水性载体液溶解形成的充气微泡悬浮液(例如，水性载体液的添加量为，使所得充气微泡悬浮液每1ml中包含的磷脂为10～200ug，例如为20～150ug，例如为50～100ug)中，微泡直径大小在0.2-10μm范围内(例如在1-10μm范围内)，每1mL充气微泡悬浮液中包含0.5～200×10^8个微泡的链霉亲和素偶联微泡(例如添加相当于包含1～150×10^8个微泡的链霉亲和素偶联微泡，例如添加相当于包含1～100×10^8个微泡的链霉亲和素偶联微泡)，每1mL充气微泡悬浮液中微泡内的包埋气体量为1～200ug(例如5～150ug，例如10～100ug)。