[发明专利]产纤维素酶的甘草内生菌及其所产酶在提取甘草中甘草酸的应用有效
| 申请号： | 201910679428.6 | 申请日： | 2019-07-26 |
| 公开（公告）号： | CN110343622B | 公开（公告）日： | 2021-01-01 |
| 发明（设计）人： | 张新国;郭广君 | 申请（专利权）人： | 兰州理工大学 |
| 主分类号： | C12N1/14 | 分类号： | C12N1/14;C12N9/42;C07J63/00;C07H15/256;C07H1/08;C12R1/77 |
| 代理公司： | 西安合创非凡知识产权代理事务所(普通合伙) 61248 | 代理人： | 于波 |
| 地址： | 730050 甘肃*** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 纤维素酶 甘草 内生菌 及其 提取 应用 | ||
1.一种产纤维素酶的甘草内生菌，其特征在于：所述甘草内生菌为G-0.5-1菌株，为尖孢镰刀菌
2.如权利要求1所述的甘草内生菌的应用，其特征在于：其所产纤维素酶用于甘草中甘草酸的提取。
3.如权利要求2所述的应用，其特征在于：包括如下步骤：
称取甘草粉末50g，按照30U/g加入G-0.5-1粗酶液，再加水至150ml，于37℃下放入摇床中酶解22h后，加70%氨性乙醇溶液，回流提取3次，每次1.5h，料液比1：7，合并提取液浓缩至150ml，滴加浓硫酸，边加边搅拌，至不产生沉淀，测其pH值为1至2，7000r/min冷冻离心15min，所得沉淀用水洗涤两次，于60℃的烘箱中干燥，即得粗品，高效液相色谱检测粗品中甘草酸含量。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于：所述G-0.5-1粗酶液通过以下方法制备所得：
将G-0.5-1菌株划线到马铃薯葡萄糖琼脂培养基上，于28℃培养3-4d，直到长成明显菌落；然后用接种环挑取少许有孢子的菌丝接种到含50 mL PDA发酵培养基的500 m L三角瓶中，于28℃，180 r/min振荡培养7-10d得到发酵液，5000 r/min离心30min，收集上清液即为粗酶液。
5.如权利要求3所述的应用，其特征在于：所述氨性乙醇溶液的体积浓度为70%，其含有0.5%的氨水。
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