[发明专利]一种坎地沙坦酯基因毒性杂质的检测方法

权利要求书

1.一种坎地沙坦酯基因毒性杂质1-氯乙基环己基碳酸酯的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1. 采用衍生化法制备样品溶液：

在碱性条件下，以碘化钾做催化剂，坎地沙坦酯原料药与自身存在的1-氯乙基环己基碳酸酯反应，水浴加热至40-80℃并搅拌，生成衍生物1与衍生物2，将反应瓶中的反应液用滤纸过滤，保留滤液作为供试品溶液，反应方程式如下：

步骤2. 对照品溶液的制备：

分别称取坎地沙坦酯衍生物1和坎地沙坦酯衍生物2的对照品，加乙腈溶解后制成分别含坎地沙坦酯衍生物1和坎地沙坦酯衍生物2的溶液，作为对照品溶液；

步骤3. 检测：

采用高效液相色谱法分别测定供试品溶液和对照品溶液，将获得的供试品溶液的液相色谱图，与对照品溶液的液相色谱图进行比较，依据相对保留时间和色谱峰面积，确定供试品溶液中坎地沙坦酯衍生物1和衍生物2的含量，色谱系统为高效液相色谱仪，色谱柱填料为十八烷基硅烷键合硅胶柱，柱温：25-40℃，检测波长为208-212nm，流速：0.6-1.0ml/min，流动相A为水，流动相B为乙腈，进样量5-50μl，梯度洗脱，

所述梯度洗脱的具体程序为：

第0-27min，A相：B相体积比为45：55-10:90,；

第27-40min，A相：B相体积比为10:90；

第40-41min，A相：B相体积比为10:90-45:55；

第41-50min，A相：B相体积比为45:55。

2.根据权利要求1所述坎地沙坦酯基因毒性杂质1-氯乙基环己基碳酸酯的检测方法，其特征在于，步骤1中，水浴加热温度控制在60℃。

3.根据权利要求1所述坎地沙坦酯基因毒性杂质1-氯乙基环己基碳酸酯的检测方法，其特征在于，步骤1中，取坎地沙坦酯供试品2-10g，加入的碳酸钾的量为0.4g-1.0g，碘化钾的量为0.04g-0.20g， 加入3-8ml N,N-二甲基甲酰胺，加热反应。

4.根据权利要求1所述坎地沙坦酯基因毒性杂质1-氯乙基环己基碳酸酯的检测方法，其特征在于，步骤1中，溶剂N,N-二甲基甲酰胺与坎地沙坦酯的体积质量比例为2-2.5ml:1g，衍生温度为60℃，反应时间为3小时，反应液用滤纸过滤，用乙腈冲洗反应瓶并过滤，滤液置于100ml量瓶中，用乙腈定容，摇匀；再精密量取5ml，置10ml量瓶中，用乙腈稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

5.根据权利要求1所述坎地沙坦酯基因毒性杂质1-氯乙基环己基碳酸酯的检测方法，其特征在于，步骤2中，分别精密称定衍生物1和衍生物2对照品各约18mg，置同一100ml量瓶中，用乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液；再精密量取1ml对照品贮备液，置100ml量瓶中，用乙腈稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

6.根据权利要求1所述坎地沙坦酯基因毒性杂质1-氯乙基环己基碳酸酯的检测方法，其特征在于，步骤3中，高效液相色谱法柱温30℃；进样量为10μl。

7.根据权利要求1所述坎地沙坦酯基因毒性杂质1-氯乙基环己基碳酸酯的检测方法，其特征在于，步骤3中，高效液相色谱法的色谱条件为：检测波长为210nm，流速：0.8ml/min，梯度洗脱。

8.根据权利要求1所述坎地沙坦酯基因毒性杂质1-氯乙基环己基碳酸酯的检测方法，其特征在于，步骤3中，确定供试品溶液中衍生物1、衍生物2的成分含量的方法为外标法。

9.根据权利要求1所述坎地沙坦酯基因毒性杂质1-氯乙基环己基碳酸酯的检测方法，其特征在于，步骤1中，取坎地沙坦酯供试品2g，加入的碳酸钾的量为0.4g-1.0g，碘化钾的量为0.04g-0.20g， 加入3-8ml N,N-二甲基甲酰胺，加热反应。