[发明专利]一种检测霉酚酸的试纸条、试剂盒及试纸条的制备方法

说明书

本发明提供了一种检测霉酚酸的试纸条、试剂盒及试纸条的制备方法，属于霉酚酸检测技术领域，所述试纸条，包括底板和在底板表面顺次搭接的样品垫、玻璃纤维膜、硝酸纤维素膜和吸水纸，所述样品垫经样品垫处理液处理；所述玻璃纤维膜经玻璃纤维膜处理液处理；所述玻璃纤维膜上包被霉酚酸特异抗体偶联物；所述硝酸纤维素膜上设置检测线和质控线，所述检测线上喷涂霉酚酸蛋白偶联物。本发明提供的试纸条，能够快速检测血液样品中霉酚酸的含量，稳定性好，线性范围广，检测成本低，操作简便。

技术领域

本发明属于霉酚酸检测技术领域，尤其涉及一种检测霉酚酸的试纸条、试剂盒及试纸条的制备方法。

背景技术

霉酚酸(MPA)，又名麦可酚酸，能够非竞争性地结合次黄嘌呤单核苷酸脱氢酶，后者是T、B淋巴细胞增殖过程中鸟嘌呤核苷酸从头合成的关键酶。霉酚酸酯类衍生物作为主要的免疫抑制剂已被国内外广泛应用于预防、治疗移植器官急性排异反应。霉酚酸酯在体内通过转化为霉酚酸而发挥免疫抑制活性。在不同的移植群体中，均可发现个体之间霉酚酸药代动力学的巨大差异，并且体内、外因素会影响其药代动力学。

随着精准医疗及个体化医疗的倡议，各种药物浓度检测也越来越受到重视。血液中霉酚酸代谢浓度过高会超量抑制免疫活性，造成免疫力低下等问题；血液中霉酚酸代谢浓度过低又不能起到其应有的免疫抑制作用，无法对移植器官急性排异反应起到治疗作用。故霉酚酸检测的重要性就尤为突出。

目前常用的霉酚酸检测方法主要有质谱法、高效液相色谱法、化学发光法及均相酶免法等，质谱法是利用电场和磁场将运动的离子按它们的质荷比分离后进行检测的方法，使用质谱仪进行检测。高效液相色谱法是以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析，分析仪器为高效液相色谱仪。色谱法及质谱法检测结果准确，但样品上样前均需要进行样本前处理，检测时间较长，并且每次只能上样一个样本，不能实现高通量的要求，使用的检测仪器成本较高，临床推广有一定限制。比浊法主要是罗氏在使用该方法检测，需要配套高成本的生化分析仪，试剂需要冷藏储存，无法满足日益增长的临床检测需要，也无法做到单人份随时检测。均相酶免法检测霉酚酸(苏州博源，申请号201510039618.3)采用免疫方法，可以在全自动生化分析仪上同时测定多个样品，实现高通量快速化测定。该方法需要使用全自动生化分析仪，并且储存温度为2-8℃，需冷链运输，不能做成单人份包装，不能达到在用药科室及时监测的目的。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种检测霉酚酸的试纸条、试剂盒及试纸条的制备方法，所述试纸条能有效的弥补上述几种方法的缺陷，能够实现常温保存、快速、高通量、单人份随时检测，所述试纸条的检测成本、操作简便，临床使用简便性大大提高。

为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：

一种检测霉酚酸含量的试纸条，包括底板和在底板表面顺次搭接的样品垫、玻璃纤维膜、硝酸纤维素膜和吸水纸，所述样品垫经样品垫处理液处理，所述样品垫处理液包括缓冲溶液、活性蛋白和表面活性剂；

所述玻璃纤维膜经玻璃纤维膜处理液处理；所述玻璃纤维膜上包被霉酚酸特异抗体偶联物，所述霉酚酸特异抗体偶联物的质量浓度为0.1～0.3％，所述霉酚酸特异抗体偶联物的包被浓度为0.5～1mg/mL；

所述硝酸纤维素膜上设置检测线和质控线，所述检测线上喷涂霉酚酸蛋白偶联物，所述霉酚酸蛋白偶联物的浓度为1～3mg/ml，喷涂量为1～3μL/cm。

优选的，所述样品垫处理液中的缓冲溶液选自PBS缓冲液、TRIS缓冲液、甘氨酸缓冲液中的一种或几种；所述样品垫处理液中的活性蛋白选自牛血清白蛋白、酪蛋白、卵清蛋白中的一种或几种；所述样品垫处理液中的表面活性剂选自吐温20、吐温80、Txiton-100中的一种或几种。

优选的，所述霉酚酸特异抗体偶联物中的偶联物为胶体金颗粒或荧光微球。