[发明专利]飞蝗HMGR基因及其dsRNA在飞蝗防治中的应用有效
申请号: | 201910684482.X | 申请日: | 2019-07-26 |
公开(公告)号: | CN110358777B | 公开(公告)日: | 2020-10-30 |
发明(设计)人: | 曾保娟;宋佳晟;周树堂;李湾湾 | 申请(专利权)人: | 河南大学 |
主分类号: | C12N15/53 | 分类号: | C12N15/53;C12N15/113;C12N15/11;C12N15/10;A01N57/16;A01P7/04 |
代理公司: | 郑州大通专利商标代理有限公司 41111 | 代理人: | 张立强 |
地址: | 475004 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 飞蝗 hmgr 基因 及其 dsrna 防治 中的 应用 | ||
1.飞蝗HMGR基因,其特征在于,所述HMGR基因的ORF序列如SEQ ID NO:1所示。
2.基于权利要求1所述飞蝗HMGR基因合成的dsRNA,其特征在于,由SEQ ID NO:9所示的正义链核苷酸序列和SEQ ID NO:9的反义链核苷酸序列组成的双链RNA。
3.用于合成权利要求2所述dsRNA的引物对,其特征在于,核苷酸序列分别如SEQ IDNO:4和SEQ ID NO:5所示。
4.编码权利要求2所述dsRNA的DNA分子,其特征在于,核苷酸序列为两端带有T7启动子的SEQ ID NO:6所示序列。
5.含有权利要求3所述引物对的试剂盒。
6.基于权利要求1所述飞蝗HMGR基因合成权利要求2的dsRNA的合成方法,其特征在于,包括以下步骤:基于SEQ ID NO:1所示的HMGR基因序列,以提取的飞蝗整虫总RNA反转录成的cDNA为模板,利用SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所示的上、下游引物进行PCR扩增,将SEQID NO:6所示的PCR扩增产物连接入pGEM-T载体中获得重组质粒pGEM–T–HMGR,再以重组质粒pGEM–T–HMGR为模板,用如SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所示的带有T7启动子序列的引物对进行PCR扩增得到带有T7启动子序列的DNA,然后以带有T7启动子序列的DNA为模板,使用试剂盒体外转录合成dsRNA。
7.权利要求2所述dsRNA在飞蝗防治中的应用。
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