[发明专利]基于MXenes和黑磷量子点增强的外泌体电致化学发光传感器

权利要求书

1.一种基于MXenes和黑磷量子点增强的电致化学发光传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1） 玻碳电极GCE 首先在铺有氧化铝粉末的麂皮上机械打磨抛光，用二次水洗去表面残留粉末，再移入超声水浴中清洗，直至清洗干净，最后依次用乙醇，稀酸和水彻底洗涤；

（2） 滴加3 μL 浓度为5 mg/mL的SiO₂ 纳米星SiO₂ NUs 于干净的玻碳电极表面，红外灯下烘干，冷却至室温，制得SiO₂ NUs修饰电极；

（3） 滴加3 μL浓度为5 mg/mL的1-羧基-3-甲基咪唑氯化铵 ILs 溶液于步骤（2）所制得的电极界面，接着将电极浸入到含浓度比为2:1的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐 EDC 及N-羟基琥珀酰亚胺NHS的混合溶液中反应40 min, 活化ILs表面的羧基，制得SiO₂ NUs/ ILs修饰电极；

（4） 滴加3 μL 浓度为1 μM 的适体Apt于步骤（3）制得的修饰电极界面, 室温下孵育40 min，用去离子水洗去物理吸附，制得Apt/ILs/SiO₂ NUs修饰电极；

（5） 取100 μL浓度为1.0×10^-2 M的 三(4,4-二羧基联吡啶)氯化钌 Ru(dcbpy)₃²⁺ 加入到含浓度比为2:1的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐EDC及N-羟基琥珀酰亚胺NHS的混合溶液中反应40 min, 再向所获得的溶液中加入100 μL浓度为5 mg/mL的聚乙烯亚胺PEI溶液，通过酰胺反应，得到Ru(dcbpy)₃²⁺-PEI复合物；将 100 μL浓度为8 mg/mL的MXenes与100μL浓度为0.1 mg/mL 的黑磷量子点BPQDs 超声混合均匀，室温下振荡6 h, 得到MXenes-BPQDs复合溶液；将Ru(dcbpy)₃²⁺-PEI复合物加入到MXenes-BPQDs复合溶液中，室温下震荡6 h, 离心，洗涤，通过静电引力和物理吸附，得到MXenes-BPQDs@Ru(dcbpy)₃²⁺-PEI复合溶液，再向上述溶液中加入100 μL浓度为50 μg/mL 的CD63抗体Ab_CD63，室温下孵育50 min, 离心洗涤后，再加入1wt.%的BSA溶液封闭非特异性吸附位点，洗涤后，得到ECL 探针MXenes-BPQDs@Ru(dcbpy)₃²⁺-PEI- Ab_CD63-BSA并保存在4 °C冰箱中备用；

（6） 将步骤（4）制得的修饰电极浸入到不同浓度的Exosomes悬浮液中并在室温下反应50 min, 制得Exosomes/Apt/ILs/SiO₂ NUs修饰电极；

（7） 取3 μL步骤（5）制得ECL探针滴加到步骤（6）所制得的修饰电极界面，室温下孵育40 min, 用去离子水冲洗电极表面,制得ECL探针/Exosomes/Apt/ILs/SiO₂ NUs修饰电极，并保存在4 °C冰箱中备用。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的MXenes由下述方法制备的：将2.0 g的钛碳化铝粉末加入30 mL, 48wt% 的氢氟酸溶液中反应24 h，离心分离洗涤后再干燥28h，得到Ti₃C₂粉末；将该粉末分散到二甲亚砜DMSO溶液中，室温下搅拌24 h，然后用去离子水洗涤数次，离心以分离粉末，直到上清液的pH达到7.0，将所得到的上清液保存在4 °C供以后使用。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的黑磷量子点BPQDs由下述方法制备的：将10 mg的黑磷晶体粉末加入到含2 mL N-甲基吡啶烷酮 NMP的研钵中，充分研磨后，将混合物转移到含6 mL NMP的玻璃瓶中；密封仔细，在100 W的功率下，在冰浴中超声8 h, 然后在7000 rpm离心20 min, 再在10000 rpm离心20 min得到BPQDs。