[发明专利]一种瓜实蝇固体培养基及其制备方法

说明书

本发明涉及一种瓜实蝇固体培养基，包括：5‑25wt％的南瓜；1‑15wt％的碳源，所述碳源包括单糖、双糖或者多糖中的一种或者多种；10‑46wt％的氮源，所述氮源包括酵母粉和/或谷物粉；0.025‑0.1wt％的钙源；以及0.25‑1wt％的固化剂，所述固化剂为琼脂和/或琼脂糖；其余为水。本发明瓜实蝇幼虫固体培养基简单高效，经济适用，易于操作，节省人工，同时可有效定量，彻底解决了瓜实蝇室内人工大量饲养的技术难题，极显著的推进了我国瓜实蝇固体培养基的研究发展，为瓜实蝇日后各项科学研究提供了大量的虫源，具有显著的经济和社会效益。

技术领域

本发明涉及生物工程领域，特别地涉及一种瓜实蝇幼虫固体培养基及其制备方法。

背景技术

瓜实蝇Bactrocera(Zeugodacus)cucurbitae(Coquillett)，隶属于双翅目(Diptera)，实蝇科(Tephritidae)，镞实蝇属(Zeugodacus)。瓜实蝇是蔬菜和水果的重要害虫，其寄主广，危害性大，包括危害南瓜、丝瓜、苦瓜、柑橘、芒果和番石榴等100多种蔬菜和水果，可造成高达30％-100％的损失。

瓜实蝇被我国列为进境植物检疫性有害生物和重点管理的外来入侵物种，其起源于印度，广泛分布于热带及亚热带国家和地区。瓜实蝇在中国各地均可以安全越夏。瓜实蝇在中国不能越冬的分布北界为(31±2)°N左右。目前瓜实蝇在中国分布于广东、广西、海南、云南、贵州、江西、福建、四川、重庆、湖南等省份和地区，其中海南、广东、广西、云南南部、四川局部地区为高度适生区。目前，该虫适生区北界已至北京北部及河北中北部，河北、安徽、湖南、江西、江苏等地的中度适生区部分已成为高度适生区。随着全球气候变暖，其适生区范围还将向陕西、辽宁、河北等地北扩，至2020年，适生区范围相比目前将增加37.04％。

随着瓜实蝇生物学、毒理学、生态学、遗传学和分子生物学等学科领域的深入研究和防治技术的发展，实验室需要大量发育一致的瓜实蝇为试验材料。但是由于瓜实蝇天然食物易受生产季节的限制，且容易腐烂变质，影响种群的扩繁和实验室的环境卫生，使得探索瓜实蝇固体培养基配方及配置方法迫在眉睫。科学人工饲养瓜实蝇，解决瓜实蝇的大量饲养及季节性短缺问题，变得更加重要。

目前关于瓜实蝇幼虫的固体培养基的研究较少，现有的固体培养基为固体粉末混合的饲料，且多包含卫生纸，使得饲料很难混合均匀，费工费时又容易被微生物污染，且成本较高而不能推广。而饲料中营养分布不均匀也是导致现有培养基瓜实蝇的子代孵化率比较低的因素之一。同时，饲料由固体粉末混合而成且饲料混合不均匀，也使得对于瓜实蝇抗性的检测较难实现。因此需要提供一种经济适用的瓜实蝇幼虫固体培养基，为瓜实蝇各项科学试验研究提供大量子代孵化率高、发育一致的供试虫源。

发明内容

针对现有技术中存在的技术问题，本发明提出了一种瓜实蝇固体培养基，包括：5-25wt％的南瓜；1-15wt％的碳源，所述碳源包括单糖、双糖或者多糖中的一种或者多种；10-46wt％的氮源，所述氮源包括酵母粉和/或谷物粉； 0.025-0.1wt％的钙源；以及0.25-1wt％的固化剂，所述固化剂为琼脂和/ 或琼脂糖；其余为水。

如上所述的培养基，所述单糖包括葡萄糖和/或果糖。

如上所述的培养基，所述双糖包括蔗糖和/或麦芽糖。

如上所述的培养基，所述谷物粉包括大豆粉、玉米粉或者木薯粉中的一者或者多者。

如上所述的培养基，所述钙源为氯化钙。

如上所述的培养基，还包括0.25-1wt％的酵母提取物。

如上所述的培养基，还包括pH调节剂，所述pH调节剂为丙酸。

如上所述的培养基，还包括pH调节剂，所述pH调节剂为0.3-1.2％的丙酸。

如上任一所述的培养基，其pH值为4-5。