[发明专利]一种千层塔内胶孢炭疽菌及其应用

说明书

本发明公开了一种千层塔内生炭疽菌及其应用，该炭疽菌的分类命名为胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期：2018年11月19日，保藏编号：CGMCC16786，将该胶孢炭疽菌发酵获得菌丝，将菌丝进行提取获得石杉碱甲。本专利为石杉碱甲的获取提供了一条新途径。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种千层塔内生胶孢炭疽菌及其应用。

背景技术

石杉碱甲分子式为C15H18N2O，相对分子质量242，是我国科学家刘嘉森首次从蛇足石杉中分离提取到了石杉碱甲。陆续的研究结果表明石杉碱甲是一种高效的、高选择性的乙酰胆碱酯酶可逆性抑制剂，石杉碱甲对乙酰胆碱酯酶的抑制作用为毒扁豆碱的3倍、加兰他敏的30倍，临床用于老年性记忆功能减退，对改善记忆功能有良好的作用，可用于治疗阿尔茨海默病等神经性疾病。此后对石杉碱甲的多项研究成果也纷纷被国际同行广泛引用。

石杉碱甲的获得有两种常规途径，化学合成和植物提取。人工合成石杉碱甲技术不成熟，植物资源匮乏，所以其产量受到了极大的限制，而且植物提取存在植物资源匮乏、植株生长缓慢生产周期长、提取含量极其低微的弊端；而且化学合成存在副产物多、反应专一性差、纯度低、构型不易控制等弊端而难以满足临床用药需求。目前，主要通过植物提取的方式获得石杉碱甲。通过植物提取的方式获得石杉碱甲主要依赖于野生资源，加上提取率仅为0.006％-0.1％，久而久之，资源必将枯竭。因此，研究石杉碱甲的新来源非常重要。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种内生胶孢炭疽菌，该炭疽菌的分类命名为内生胶孢炭疽菌，Colletotrichum gloeosporioides，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期：2018年11月19日，保藏编号：CGMCC16786，并利用CGMCC16786发酵培养可生物合成石杉碱甲，为石杉碱甲的获得提供新途径。

本发明采取的技术方案包括：

一种千层塔内生胶孢炭疽菌，该炭疽菌的名称为胶孢炭疽菌，Colletotrichumgloeosporioides，该炭疽菌的保藏编号为CGMCC16786。

本发明千层塔内生胶孢炭疽菌用于制备石杉碱甲的应用。

可选的，所述的制备石杉碱甲包括：将所述的千层塔内生胶孢炭疽菌在PDA液体培养基中发酵培养，收集发酵培养产生的菌丝提取获得石杉碱甲。

可选的，所述的制备石杉碱甲包括：将所述的千层塔内生胶孢炭疽菌在改良的PDA液体培养基中发酵培养，收集发酵培养产生的菌丝提取获得石杉碱甲；

改良的PDA液体培养基为在PDA液体培养基中添加千层塔植株水提物。

可选的，按占PDA液体培养基的体积百分数计，千层塔植株水提物的添加比例为10％～40％。

可选的，按占PDA液体培养基的体积百分数计，千层塔植株水提物的添加比例为20％～30％。

可选的，所述的千层塔植株水提物的制备包括：以千层塔植株为原料，按照每克原料10mL水的比例稀释，煮沸提取后的液体即为千层塔植株水提物。

可选的，所述的发酵培养的温度为28℃，发酵培养的转速为120转/分钟。

可选的，所述的菌丝提取获得石杉碱甲包括：液氮研磨菌丝至粉末状，按照1：5(g/v)的比例加入体积百分数为0.5％的盐酸溶液，收集上清液调pH至9.0，等体积的三氯甲烷对上清液抽提3次，合并有机相并浓缩有机相至粘稠状即得。