[发明专利]南极来源的产低温几丁质酶菌株及其发酵方法有效
申请号: | 201910690763.6 | 申请日: | 2019-07-29 |
公开(公告)号: | CN110423711B | 公开(公告)日: | 2022-07-15 |
发明(设计)人: | 丁海涛;陈波;俞勇;廖丽;刘克振 | 申请(专利权)人: | 中国极地研究中心(中国极地研究所) |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N9/42;A01N63/27;A01P3/00;A01P1/00;A01P7/04;A23L33/135;A23L33/10;A23K10/18;A23K10/10;A61K38/47;A61P31/10;C12R1/38 |
代理公司: | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人: | 陈静 |
地址: | 200136 上海*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 南极 来源 低温 几丁质 菌株 及其 发酵 方法 | ||
1.一种经分离的几丁质酶生产菌株,该菌株保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏号为CCTCC NO:M2019207;该菌株为假单胞菌属(Pseudomonas sp.)的菌株。
2.如权利要求1所述的几丁质酶生产菌株,其特征在于,该菌株的16S rDNA全基因碱基序列如SEQ ID NO: 1;或
所述的几丁质酶是低温几丁质酶;或
该菌株为适应低盐环境或淡水环境的菌株。
3.权利要求1~2任一所述的几丁质酶生产菌株的细胞培养物,其具有选自下组的特性:(a)含有几丁质酶;(b)水解几丁质;(c)具有抑制病原微生物Verticillium dahlia,Fusarium oxysporum f. sp. cucumerinum,Aspergillus niger,Penicilliummacrosclerotiorum能力。
4.如权利要求3所述的细胞培养物,其特征在于,所述细胞培养物为细胞代谢产物、细胞培养上清或细胞裂解产物。
5.权利要求1~2任一所述的几丁质酶生产菌株的应用,用于:
(1) 生产几丁质酶;或
(2) 制备细胞培养物,其具有选自下组的特性:(a)含有几丁质酶;(b)水解几丁质;和/或(c)具有抑制病原微生物能力;所述病原微生物为Verticillium dahlia,Fusariumoxysporum f. sp. cucumerinum,Aspergillus niger,Penicillium macrosclerotiorum。
6.如权利要求5所述的应用,其特征在于,所述细胞培养物为细胞代谢产物、细胞培养上清或细胞裂解产物。
7.权利要求3所述的细胞培养物的应用,用于抑制植物病原微生物,或用于制备具有抑制病原微生物能力的组合物;所述病原微生物为Verticillium dahlia,Fusariumoxysporum f. sp. cucumerinum,Aspergillus niger,Penicillium macrosclerotiorum。
8.如权利要求7所述的应用,其特征在于,所述细 胞培养物为细胞代谢产物、细胞培养上清或细胞裂解产物。
9.一种组合物,其包含选自下组的成分:
权利要求1~2任一所述的几丁质酶生产菌株;或
权利要求3所述的细胞培养物。
10.如权利要求9所述的组合物,其特征在于,所述细 胞培养物为细胞代谢产物、细胞培养上清或细胞裂解产物。
11.一种应用权利要求1~2任一所述的几丁质酶生产菌株生产几丁质酶的方法,包括:在以下条件培养所述几丁质酶生产菌株:
在低盐或淡水中培养;
以葡萄糖、甘露糖或核糖作为碳源;
以蛋白胨作为氮源;
添加5~20 g/L几丁质;
添加0.2~5 mM镁离子;
温度10~40℃;
pH6.2~7.5;
转速50~300rpm;
培养时间4~7天。
12.如权利要求11所述的方法,其特征在于,以葡萄糖作为碳源;
温度为15~25℃;
pH6.5~7.3;
转速100~250rpm;
培养时间5~6.5天。
13.如权利要求11所述的方法,其特征在于,
碳源葡萄糖的浓度为15±5 g/L;
蛋白胨的浓度为1±0.5 g/L;
几丁质的浓度为15±5 g/L;
镁离子的浓度为1±0.5 mM。
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