[发明专利]快速检测汉赛巴尔通体抗体的胶体金检测卡及其试剂盒

说明书

本发明公开了一种快速检测汉赛巴尔通体抗体的胶体金检测卡，该检测卡包括：基础背板、样本垫、金标垫、检测膜、吸水垫。样本垫、金标垫、检测膜、吸水垫依次排列设置在基础背板上部。金标垫中包被有兔抗猫抗体IgG。检测膜上设置有检测线和质控线，检测线上包被有汉赛巴尔通体抗原，质控线上包被有山羊抗兔IgG。该检测卡能够有效检测血清样本中的汉赛巴尔通体抗体，特异性好，敏感性高。

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种汉赛巴尔通体可视化快速检验技术，具体涉及一种快速检测汉赛巴尔通体抗体的胶体金检测卡以及包含该检测卡的试剂盒。

背景技术

巴尔通体是巴尔通体科内的一个亚变形杆菌属，是一种微曲、革兰氏阴性、嗜血、杆状且苛养、生长缓慢的兼性胞内病原体，对绝大多数的哺乳动物宿主具有很强的适应性，主要通过节肢动物传播^[1]。已从人类、家畜和野生动物中分离或检测到38种不同的巴尔通体^[2]。近年来，随着我国宠物数量的提升以及在媒介生物传染病新形势下，巴尔通体的研究的重要性不断上升。

犬、猫及人中检测出的相关巴尔通体种属中，至少有13种巴尔通菌属或亚种被认为是人类疾病的病原体。其中杆菌样巴尔通体、五日热巴尔通体和汉赛巴尔通体导致了大多数临床疾病^[3]。由于其他巴尔通菌属的血清学检测在人群中的检查中很少进行，从而难以从患者标本中分离到这些细菌。文森巴尔通体伯格霍夫亚种以及其他种属仅仅被认为是人类疾病的可能原因^[4]。

而与宠物最相关的巴尔通体种属为克氏巴尔通体、伊丽莎白巴尔通体、汉赛巴尔通体、五日热巴尔通体和文森巴尔通体伯格霍夫亚种。所有这些物种都与猫或狗的严重疾病有关，并且都具有导致人畜共患病的潜在危险^[5]。

准确诊断巴尔通体感染的诊断和鉴定方法仍然是具有挑战性的工作。目前尚无阴性结果可确保无感染的诊断技术。最常用检测急慢性感染的技术是微生物培养技术、聚合酶链反应(PCR)^[6]。

包括裂解离心、细胞培养分离和生长富集等在内的专业培养技术是确认巴尔通体感染的“金标准”。巴尔通体培养的最佳生物样本是血液、脑脊液、关节液、病理性积液和组织活检^[7]。由于巴尔通菌属苛养、生长缓慢，因此需要的检测周期较长，即使经过长时间孵育后的阴性培养并不能排除巴尔通体感染的可能性^[8]。

PCR检测巴尔通体可以使用多种特异性引物通过DNA测序来确定该物种^[9]。但由于其需要使用专门的仪器的特点，限制了其在病媒现场检测的能力。

血清转化可通过记录抗体滴度在2-3周的时间内是否升高4倍来确认急性巴尔通体感染^[4]。但迄今为止很少使用血清学或其他诊断方法来检测患有急性起病的猫或狗。

免疫组织化学与其他抗原检测技术相比的主要优势是能够直接识别组织样本(如心脏瓣膜或淋巴器官)中的微生物。但对生物整体的检测没有太大优势。

参考文献：

1、Breitschwerdt EB,Maggi RG,Chomel BB,Lappin MR.Bartonellosis:anemerging infectious disease of zoonotic importance to animals and humanbeings.J Vet Emerg Crit Care.2010；20:8–30.

2、Lappin MR,Kordick DL,Breitschwerdt EB.Bartonella spp.antibodies andDNA in aqueous humour of cats.J Feline Med Surg.2000；2:61–8.